求助！玻片细胞贴壁问题！

Tim

# X8 Y2 T) C4 f4 ~, f
# B) m) ^4 y: E; @$ }     我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！ 希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

jhu132llh

& ^) j- W, l! g4 i' W# T

7 b5 y9 y+ b9 y. o% x接种的问题
* a6 S: [# a* q) [0 M6 |接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞
6 i5 x* h" `7 v: b6 @; S7 j因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

quge_00

' R# q8 s' }" v' K) J6 _
0 D/ z+ @6 e2 P7 Z3 D
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- `, }" j% R0 I7 M, \( i9 S9 N& y. Y' L! u, |
1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；
' O1 |; q: p4 F2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；+ x% N2 H/ a! I. c( W( y6 E
3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，  I' W  [  M0 E, T9 Q3 [* h
小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间
, `8 w0 M0 X1 h0 H+ z（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）
1 ?% C$ i( p0 L: e, L6 e4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

Tim

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4 U) i6 a; G6 k- {方法极好！非常感谢！

小渝

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) M" L5 D& ~5 E) O" P: [9 s4 D& |: w# s! h/ r
我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。

Tim

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$ ~* U5 c# B- ]! e
这样加培养液后细胞！玻片会飘起来的！

小渝

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$ M: {" F4 V9 b/ v4 U0 j; f% D- U' t# E( m! k$ q
不会呀，我总共滴加的培养液就是大概刚好覆盖整个玻片就够了