细胞免疫荧光问题

shxwang

请教大家为什么分化5-6天的神经元也会被胶质细胞的marker GFAP给染上，有没有什么mraker可以将神经元和胶质细胞区分开？谢谢！

birdflubirdflu

回复 shxwang 的帖子' ~; \/ f9 ]# D! @

" B& e/ a% c' I( O. _* c  ?请注意神经元的progenitors也是表达EGFP的 ，所以你可以使用S100b 染，或者使用definitive astrocyte markers。

dianying

回复 birdflubirdflu 的帖子- A$ {7 H0 M5 Z& F9 N9 s% f' o: P. h
* x' Q! \; d/ s* B1 o3 h3 F
EGFP 和 GFAP 都是啥子关系？给补补课呗。

shxwang

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. D& r. l! _$ R& F
/ V' ^+ c& v$ r! X" O谢谢。但是S100b 好像会被分泌到胞外，这样还能染上胶质吗？我查阅了一些资料，但是很难找到definitive astrocyte markers，好像一般都是GFAP，你可以像我推荐一下么。十分感谢你~

birdflubirdflu

回复 dianying 的帖子& Q: f6 i4 L$ X: _2 [6 g; T4 l3 g3 _0 w

$ y$ t- `  d: e! U3 v1 j# V& g0 L打错了。。 我本来想打GFAP的，sorry.

lxm5668

把神经元和胶质细胞区分开,找到他们分别的特异性表达蛋白就行了。
0 H  l( a: `* e3 w7 z( B- c神经元特异烯醇化酶（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）分别是他们的代表性蛋白。
9 i/ H' G. ?* a$ dS100b 是标记雪旺细胞的。

如来的观音

NSC分化5-6天可能有部分分化为胶质细胞，区分神经元和胶质细胞可用神经元特异烯醇化酶或β-III-tubulin（神经元）和胶质纤维酸性蛋白（胶质细胞）

cortex

应该说用β-III-tubulin或者Map2标记神经元,用GFAP标记神经胶质细胞是可以分开的.你应该考虑你GFAP染色是否是假阳性.据我所知兔多克隆抗体GFAP很容易出现这种情况.

shxwang

回复 lxm5668 的帖子: g# d& @2 p  A9 t$ ]$ u5 z7 {

/ d$ q5 b1 b" ~; [& E* V) e谢谢~但是我的细胞只分化了5-6，还不是很成熟，不知道能不能染上。

shxwang

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  y: }6 b% o  e0 Y; _+ q1 y( a) D1 V8 l
1 q0 ]* b$ O4 ^& V: [4 i6 j谢谢~我上次用了β-III-tubulin，但是发现神经元和胶质的形态已经有明显的差异，但是这两种细胞都能被染上β-III-tubulin，不知道为什么。。。