哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

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1．取材8 I+ r8 ?( w* \9 m* H% b
取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。
1 a2 Q0 K! U0 e  i: ?2．材料处理        7 H8 z- ^$ C% s( r, _  Z  Y
（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。( p% \1 J+ s1 y8 r! Y5 Y
（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。( t  S& Q4 I5 c+ c, q5 i) v
（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。
9 ?" Y  X( |6 j& a: A. q2 O1 d3．细胞培养, m: U* M) J' a  ], l
（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。
$ Q, V2 n' z( V1 {1 u; Y6 |. P（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。8 v2 q* L& ^( c& f# C$ D; }& ^
（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。
0 w, _4 ^/ ]7 V7 u- T, g（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出. W% ^/ w% `+ E, n2 U1 ~3 s