配制mES培养基的方法

mayiwaiwai

培养基成分是，DMEM,10%FBS,100X NEAA,100X L-Glu,1000X 2-ME,1000X LIF,配制500ml的培养液，师兄的配方是：把除了LIF以外的东西混合，LIF用时直接加到培养皿中
" t2 t8 d% Z3 T9 M; O# d50ml FBS + 5ml NEAA + 5ml L-Glu + 0.5ml 2-ME,再用DMEM补到500ml,还有人说是加50ml FBS ，再加450mlDMEM,然后再把其他的添加物按比例放进去，这两种方法哪个队呢，后者配制的培养液总体积不就超出500了么？

zpzp0312

用的快就不必考虑现用现加LIF了- ~% N$ k$ B1 F
只要一周之内能用完，完全可以一次性配制好，4度保存就可以

jhu132llh

显然3 S5 T! m) D/ ]& ?) a9 d, D
理论上市要安第一种方法做的
9 W% b" i5 A+ {' A, a$ x因为这样出来的是最准确的体系* L9 s  ^3 i, ]8 W7 H
然而
; a/ Y7 d+ e5 A一般我们都比较懒，很少计算这么详细- o0 T! C! C+ p2 A" a' q
于是，我个人一般都是使用第2种方法
. y3 Q0 A  |* n; w: O7 ~一是因为这个计算量小，方便
- E" {' |' G; a/ S二是因为其实这些添加剂对于浓度要求不是特别的精确，所以我们就忽略那个500ml中多10.5ml# W* E( Z5 _  r% Z- V% d2 V
对浓度影响不大
- `% j/ S7 D/ T0 x, H! U6 S但是如果遇到对浓度要求特别精确的药物，还是要使用第1种方法