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[请教] pLat-E细胞包装的pMX不能感染其他动物么 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2012-9-4 08:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
pLat-E细胞包装的pMX病毒,只能感染小鼠细胞,不能感染其他动物么?6 g$ G4 t) c0 X6 P
293T也不能被感染?
5 `4 P6 }8 y6 i6 [6 `# J! i如果将pLv-VSVG和pMX共转染,包装出来的病毒是不是可以扩大感染对象?; m9 s( u0 n. O6 \  H
求经验,,
% _) K2 O& e8 n, j$ i
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

沙发
发表于 2012-9-10 11:32 |只看该作者
三种逆转录病毒包装细胞系:单嗜性(Ecotropic)Plat-E包装细胞系、双嗜性(Amphotropic)Plat-A包装细胞系及泛嗜性(Pantropic)Plat-GP包装细胞系。它们对不同的细胞具有不同的侵染性。" p1 D9 T" s$ f6 i' \) R/ D
Plat-E包装细胞系(Ecotropic)是一种来源于人胚肾(Human Embryonic Kidney, HEK)293细胞系,主要用于快速、短暂地产生高滴度逆转录病毒,同时也能用于稳定地产生逆转录病毒。由Plat-E包装细胞系产生的病毒表达一种单嗜性的被膜,因而只能感染小鼠和大鼠细胞。
2 T5 a2 ]* z$ b: G7 }3 E# OPlat-GP包装细胞系(Pantropic)也来源于HEK293,但却是一种泛嗜性的包装细胞系,其包装产生的逆转录病毒颗粒既能感染哺乳动物细胞,也能感染非哺乳动物细胞。在使用过程中, Plat-GP细胞需要用逆转录病毒载体和pVSV-G来共转染。VSV-G是泡状口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus) 的被膜糖蛋白,能通过脂质结合及质膜融合来介导病毒进入细胞。因此在使用Plat-GP细胞系时,还需要额外的使用pVSV-G完成包装。
, v! J6 a/ E0 OPlat-A包装细胞系(Amphotropic)也是一种来源于HEK293细胞的细胞,在将病毒env 基因导入该细胞时利用嘌呤霉素作为选择标记,因而对于一些使用嘌呤霉素作为筛选标记的载体无法使用。
" Y* c9 Y0 O  D/ s/ h    一般来说,Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞;Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞(但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G,该外壳蛋白宿主范围非常广);Plat-A其宿主范围比Plat-E要多一些,比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等。0 i( G) i# D/ ^* P7 b
忘记在哪里看到上面的内容,看完你应该理解了。
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藤椅
发表于 2012-9-10 14:52 |只看该作者
本帖最后由 gact 于 2012-9-10 14:59 编辑 8 o( ?. J$ T' p* W. `& S( e
, D# u9 ~$ T$ @: |- O
回复 nculsa747 的帖子9 \) i) X4 H  {7 |: f7 g
) n( p$ {# h4 h
大概知道,看了你的帖子后,更系统了,谢谢!
  j0 s3 ]3 y1 e' X" E: ]* S包装细胞都是改造过的细胞,整合了包装的蛋白gal\pol,自己骨架质粒上携带有包装信号,会利用宿主环境来包装病毒颗粒。8 z+ d' @, H# [$ M8 e
因此,plat-E针对鼠类细胞设计的,就是说在改造病毒时,只为该细胞系设计了鼠类拥有的受体。! F, B+ l# e8 i
而人类细胞缺少这种受体,所以不能被感染。
" \. P& W  U0 I1 k+ J; n问题:$ U1 {: _' u2 b- g2 G6 @
这些整合在细胞中的基因部分,在结构和功能上,有哪些差异?
3 K( P9 n) O9 U6 L
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