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三种逆转录病毒包装细胞系:单嗜性(Ecotropic)Plat-E包装细胞系、双嗜性(Amphotropic)Plat-A包装细胞系及泛嗜性(Pantropic)Plat-GP包装细胞系。它们对不同的细胞具有不同的侵染性。" p1 D9 T" s$ f6 i' \) R/ D
Plat-E包装细胞系(Ecotropic)是一种来源于人胚肾(Human Embryonic Kidney, HEK)293细胞系,主要用于快速、短暂地产生高滴度逆转录病毒,同时也能用于稳定地产生逆转录病毒。由Plat-E包装细胞系产生的病毒表达一种单嗜性的被膜,因而只能感染小鼠和大鼠细胞。
2 T5 a2 ]* z$ b: G7 }3 E# OPlat-GP包装细胞系(Pantropic)也来源于HEK293,但却是一种泛嗜性的包装细胞系,其包装产生的逆转录病毒颗粒既能感染哺乳动物细胞,也能感染非哺乳动物细胞。在使用过程中, Plat-GP细胞需要用逆转录病毒载体和pVSV-G来共转染。VSV-G是泡状口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus) 的被膜糖蛋白,能通过脂质结合及质膜融合来介导病毒进入细胞。因此在使用Plat-GP细胞系时,还需要额外的使用pVSV-G完成包装。
, v! J6 a/ E0 OPlat-A包装细胞系(Amphotropic)也是一种来源于HEK293细胞的细胞,在将病毒env 基因导入该细胞时利用嘌呤霉素作为选择标记,因而对于一些使用嘌呤霉素作为筛选标记的载体无法使用。
" Y* c9 Y0 O D/ s/ h 一般来说,Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞;Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞(但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G,该外壳蛋白宿主范围非常广);Plat-A其宿主范围比Plat-E要多一些,比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等。0 i( G) i# D/ ^* P7 b
忘记在哪里看到上面的内容,看完你应该理解了。 |
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