神经干细胞增殖能力检测实验方案分析求助，急！

angelyannan

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& @0 A9 {& |* \6 D! {* y前段时间做了神经干细胞增殖能力检测的实验，细胞按照1×10*4cells/cm*2的密度接种24h后添加干预，分别在干预后的4h、8h、16h、24h后结束培养。并且在每一组结束培养前添加BrdU孵育两小时。结果发现control组的BrdU阳性率没有发生变化。导师认为结果不可信。可是本人通过查找文献发现其实本实验所设定的干预时间范围还是比较窄的，所以基本上没有变化也是说的过去的。但是有有文献中相近的实验方法中BrdU阳性率有较大程度上的变化。最近很纠结，一直没能找到有力的文献来支持实验结果。请问各位大侠有没有了解相关实验的。给点建议或者帮忙提供点正反面的证据。谢谢啦

xiaozhu050729

回复 angelyannan 的帖子2 `6 C* ]9 B  V$ ~! \) u

; S' i9 {! T. ^; s- B' m! z请教大神神经干细胞的Brdu的标记方法

angelyannan

回复 xiaozhu050729 的帖子* `7 Y  O& V: v1 A3 t, }3 Q1 _/ Q

& e% {9 s- Q+ p7 \8 O  M' Z这个根据实验要求的不同而采用不同的BrdU掺入浓度和孵育时间吧~我采用的方法是结束培养前孵育BrdU两小时(10uM)，然后免疫荧光发检测BrdU阳性率。具体的还要根据你自己的实验调整吧

yzhang_pumc

想问下楼主，你是BrdU/Hoechest双染色么，，最近我在做这个，发现BrdU染色挺好，但Hoechest染的细胞核特别不清楚，比较弥散，，，求问下原因呗。。。。谢谢~~