荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢

hn1022

我也要做胚胎的RNA FISH ，想请教一下protocol呀！谢谢

l19rna

回复 hn1022 的帖子* F0 C5 ^! T: w

4 G& H8 A& S+ e. |- {+ R" d$ w( a不同天数的胚胎的ptotocol会有细节上的差别，我做的比较早期，建议参考nature protocol上的文章： # @: k, g0 T& s4 i
Title：An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies
; {1 n+ C* d0 m9 J! c* I

无心

无心

想了解

icebaby

做ISH，最常用的还是Riboprobe吧？我想FISH也应该是这样的。我最近要做ISH，探针的话想找个公司来做。

doctorrobin

我想请教一下想做一个对照内参探针找什么基因比较好 本人刚接触ish

细胞海洋

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; m( B7 ]+ Y2 F8 z! Y
% p# E# Q$ W, H& }5 Y2 z& e建议你发新帖提问

l19rna

回复 doctorrobin 的帖子. B& H* s! u5 L  y7 p( c
# y$ [0 I% G; `) P2 h
我一般是用别人已经发表的探针，而且其表达谱是公认的，才用来做阳性对照；
+ V; I- u- e+ G2 }  |7 S阴性对照就选择cRNA的互补序列，这个在你的cRNA载体上转录出来就行。

l19rna

回复 icebaby 的帖子5 V1 u* b' F  ^

) k7 Y2 {, N1 y7 J$ `- hFISH已经有很多更高效的方法。尤其是做单细胞且定量的FISH。其探针也有很多种，除了传统的，还有50bp长度，19-24bp长度探针，等等