荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

准备做RNA FISH，白手起家啊

l19rna

回复 xxp1246087085 的帖子
1 `" D7 E* Z, H5 f2 q% p
1 U7 A% s/ j" x! C兄弟加油，我已经搞定了

xxp1246087085

回复 l19rna 的帖子
9 s' O7 J$ c# F$ j% ?$ K+ L( S0 K" t0 W$ F8 H2 s
以后还要多多请教啊

l19rna

回复 xxp1246087085 的帖子. p9 S+ O/ M) a, I5 M

( V! u+ s6 P2 N我现在只会做whole mount ISH of mouse embryo，不知道能不能帮到你了，呵呵

xxp1246087085

回复 l19rna 的帖子3 J7 m" B' U# Q. j/ n7 Q

: V/ j6 x/ |8 Q' J我现在设计的500bp长度的探针，末端会有1-2bp的不匹配序列，不知道对结果有影响没有，我用的RNA探针

l19rna

回复 xxp1246087085 的帖子" T7 k; d7 P; q

5 t1 x( J4 K2 {/ w木有影响，放心吧。你做体外转录时候还有载体上的一小部分序列呢，不会影响结果的

flybear

FISH要求的长度是1000-1200bp左右吧，如果做细胞的可能要考虑你的转化效率了！！！片段太短，特异性很差，这个楼主要考虑了！！！

flybear

做这种fish，先弄最好做的，比如actin等，做个阳性对照了！！！出来了，再做目的基因的！！！！

l19rna

回复 flybear 的帖子
* ]) x) V. x. P! g' W% N* o3 ~
0 s/ K+ B6 n$ X9 \  \嗯嗯，非常感谢分享经验

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢