293T细胞团中央黑色不明物

sizhengliu

回复 huangcong1988 的帖子
: s0 k4 g3 K8 Y$ B
* E& Q6 I- S7 |( ?# z换液前没有，换液后观察就可以发现。以前还真没注意过。不过贴壁再培养一段时间就没有了。
0 S/ m4 J- q& X- V8 |* m" d这气泡是怎么长进去的！

sfk06

根据经验推测，应该是气泡，你可以放一段时间之后再观察一下

wcfeng88

是气泡。六孔板没铺好，是没有晃均匀，或者晃均匀后细胞没贴壁就移动它造成细胞重新分布
3 f, N; M: G  j/ R以后可以试着放回培养箱里的时候，直接在培养箱里晃均匀就不好动它了。

huangcong1988

回复 sizhengliu 的帖子
/ D4 [2 W& V$ z: b. b# f& z% M0 H) M! w. |" \! R
本来293T就不应该太大幅的晃动，应该换液后也不会有气泡的，但是，你换液后有气泡，这个真的很奇怪，一般是消化传代后会有一些气泡，但随着培养进行，气泡会自动消失的。你这个细胞形态，我感觉不是很对

franklinhg

I think it is some bubbles, and then the cells grow not healthy, I do not know why.

telomerase

1 Z  t2 Y# J8 ^8 J$ }$ G
  q, e4 ^: u9 U! {2 O$ x7 c1 N气泡$ T+ G" C. Q9 ~8 f6 S, g, C
另外你的细胞养的也太那个了，包病毒应该不会有好的结果，重铺吧
3 t2 Q) e  l- p# [或者重复一个，养个1-2代再铺，老了就不好使了

hwlightning

回复 sizhengliu 的帖子
) f0 q  a1 k% ]% N6 L7 b! K  [& L, l8 S; P/ F
肯定是你种细胞没有混均匀，细胞如果再皿里不均匀细胞的包装效率会大大降低。

sizhengliu

回复 wcfeng88 的帖子
9 }0 G; |0 B; ~$ C; T' ?! b- B- f/ y$ j
我一般是显微镜下晃匀，放几分钟后就拿到培养箱。你说的在培养箱里晃匀，具体手法请指教？

sizhengliu

回复 huangcong1988 的帖子
7 e" d9 C9 p4 V7 B8 \. n; v
! Q* V* W3 i( F0 C恩，这是复苏2天的样子。我也觉得不太好，以前这么养的也没出现过类似问题啊，不会是我操作的问题吧？

sizhengliu

回复 telomerase 的帖子
+ O( O# h0 F! q0 X
$ v" c- k+ Q4 K/ V# c5 I9 @, m! U4 |" q谢谢！
4 H, m" e  [, ?请问您在转质粒时加不加血清呢？转染后48h内培养基加不加血清和双抗呢？（说加和不加的都有）