请教胚胎聚合方面的问题

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最近做胚胎聚合，可是胚胎一直聚合不上 ，我们在做的过程中发现，在去掉透明度后，仍有一层薄膜，胚胎一直聚合不上，想请教下这是怎么回事？
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have-a-rest

什么胚胎啊，透明带怎么去掉的？

zpzp0312

通常来说，透明带是可以去掉的
8 T$ I" q- \5 s; i3 }# v9 J如果遇到楼主这个情况应该是在去透明带时没有观察仔细# N9 `$ B6 n/ q4 u# V6 L
你可以把那些看似还有一层薄膜的胚胎处理时间延长一些，“过处理”一下，让若干容易去除透明带的胚胎多处理一段时间，到时候可以淘汰不用。剩下的胚胎透明带应该大部分都去除了。9 A5 ?. f1 H4 k0 j" G6 k; F& x" ]% j
另外聚合过程中一定要在一个小的空间里进行
9 }$ h! z4 ~6 b7 K! z. e& P8 Z, `  O如果没有合适的工具6 t8 [; R5 Y4 N
也可以考虑使用一些促进细胞粘连的试剂
8 C+ N# R; F( T' ?- N% n5 v楼主做的是ES聚合还是胚胎聚合（二倍体/四倍体）？
- Z) O1 F; w7 s用的ES细胞和胚胎的品系都是什么啊？

461650833

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; b+ W7 S5 s0 n8 e: B, M7 y. j% s, U5 b; F! X
猪孤雌胚胎啊 用的是pronase

461650833

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5 `# R8 o+ y+ z! \
9 O5 U1 d3 e1 K$ Q6 X做的是猪孤雌胚胎聚合，做了几次都没有聚合上。
& w& o/ F. D, s* k7 F你所说的小空间，可以是WOW培养系统吗？/ e) T0 Y8 b# Y6 R+ m; z
促进细胞粘连的试剂可以用什么，植物凝集素可以不？

zpzp0312

看来你那里的实验室配套设施应该挺齐全的! M: T2 F7 ?! ?/ z! f) v" u; j
说的都对* ~/ {4 N( z2 _1 V" h
目前似乎就是透明带处理有问题了，多处理一段时间，通常来说在镜下应该能看出来是否已经除去透明带。
/ @& `: s0 J9 h+ }如果看不好就收集那些似乎沾到培养皿底部的胚胎，轻轻一吹就下来了。这样的胚胎透明带绝对已经去掉了！

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我们试试多处理一段时间 看看效果