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脐带间充质干细胞的提取   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-5-7 10:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
做了一次细胞提取,脐带中的血管和外膜组织很难分离,我是剪成4厘米左右,用剪刀和镊子根本分离不出来,而且脐带很滑,固定不了,谁有好的方法给点建议,谢谢了
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沙发
发表于 2012-5-7 11:30 |只看该作者
很难不代表不行,多练练手就好了。$ M$ K& g* z% J3 _3 I+ B. O
直接上剪刀试试,应该也行。
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藤椅
发表于 2012-5-7 12:33 |只看该作者
第一,要多练;第二,可以试试加酒精,泡下脐带,但是铺瓶时记得要用盐水洗洗,否则就长不出来了。
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板凳
发表于 2012-5-7 12:54 |只看该作者
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这个东西多做几次就行了,得用好点的有齿镊。脐带酒精消毒后,盐水冲洗一下,剪成2cm左右的小段。剥离胶体的时候,将脐带小段移到干燥的培养皿里,便于操作。从截面找到两条动脉和静脉(“品”字形),一手一把有齿镊,从一条动脉和静脉中间撕个开口,慢慢将脐带撕开展开成平面的,然后去掉动静脉血管,这个要小心,一点一点的剥离,防止血管撕断了。然后就可以撕上面的胶体,不撕破羊膜就行了。
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报纸
发表于 2012-5-7 13:34 |只看该作者
工具选的对么,用有齿的组织镊子,长度最好长一点(省力时间久了不累)。
1 j$ m$ l4 |# }) o第一次分离是有点难,建议你先拿一段脐带到超净台外面,观察下脐带的结构。2 {& {7 g0 @% i5 I" n/ u* A
大体分为两条动脉、一条静脉。很容易区分,用两个组织镊子沿剖面挑一下,就会发现动脉和胶区分很明显,两铅笔芯大小的白色动脉。
; v( X. P  E* @2 f( i+ X静脉可以用剪刀伸进去的,沿着静脉剖开,这时候脐带还是不太容易铺平(由于有静脉的存在会把脐带还有拉回管状的状态,可以利用这个特性检查膜是否去干净): A: ^% y& h% s8 h: j0 f& x
去静脉膜很关键,靠多做和观察(上面已经说了怎么检验就不多说了)( N+ a( i# i9 m
去动脉,相比静脉简单点,从剖面找到动脉位置,哪里有胶就把哪里撕开,直到它全部暴露出来然后去掉。
4 t6 k7 h. o0 X5 M5 ^) w; d剩下的就是外膜和胶,把胶一点点的从膜上剔除下来' Q1 b: r* t6 J

6 S. a5 U, y. A" s" s
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地板
发表于 2012-5-8 11:09 |只看该作者
谢谢各位了
$ [- o( t* ]9 u' [8 |1 G

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发表于 2012-5-9 12:28 |只看该作者
一般脐带拿到后大约10厘米长吧,剪成两段,然后你可以那剪子在一端剪出一个豁口,然后用两只镊子夹住两段一点一点往下撕,撕下来的都会很薄 还是成条状,这样你还很容易的就把外膜去除了,同时也能将动脉和静脉分离下来 剩下的华通氏胶你就可以用于实验了。其实去外膜就是个慢活,你多做几次就熟悉了。
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发表于 2012-7-13 10:52 |只看该作者
chrismine 发表于 2012-5-9 12:28 " C. k* ~8 M+ ^4 k- A: W2 B0 K7 r
一般脐带拿到后大约10厘米长吧,剪成两段,然后你可以那剪子在一端剪出一个豁口,然后用两只镊子夹住两段一 ...
; D# B# ]  @: u  H3 c2 U
受教了

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发表于 2012-7-13 11:10 |只看该作者
回复 andylee824 的帖子
: d  [/ o+ {- v  y
4 t# G  Y1 }+ @* Q1 s  k用盐水洗洗才能长得出来 ?为什么呢?
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发表于 2012-7-13 11:22 |只看该作者
个人经验,剪得越短越好,越短就比较方便一下子抽离,如果过长,容易导致抽一半就断掉了,所以我一般剪0.5cm,这样虽然剪的时候花点时间,但是分离的时候会很快。
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