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ophden

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楼主

发表于 2012-4-16 12:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

取了人的结膜后，用一型胶原酶消化1h, 37°C，置摇床上，结束后DMEM培养液中和离心一下，再用DMEM F12培养，T25的瓶子放了4ml 培养液，组织团块基本可以接触瓶子底部，结果几天后任然没有结膜上皮细胞从组织块中爬出，而且组织块一直不如脂肪块那样容易贴壁。

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yuhaoze

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沙发

发表于 2012-4-23 09:15 |只看该作者

消化以后不要加那么多培养液，T25加500uL就够了，再就是还需要把结膜上皮剪成小块儿，这样比较好迁出来。另一个方法就是跟做MEF一样的，直接诶用胰酶消化，用管子吹大地没多少沉淀了，这样细胞就成单个游离的了，再加5mL培养液培养就行了。还有一个方法，就是准备点儿羊膜，用胰酶消化去羊膜上皮，把你的结膜上皮弄在上面，这样长得快

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