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楼主: ligangtiancai
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求助,大家帮忙看下iPSC上的小圆点是什么?   [复制链接]

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金话筒 优秀会员 热心会员 小小研究员 积极份子

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发表于 2012-4-1 09:18 |只看该作者
换个液还有就不是细胞碎片。
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发表于 2012-4-1 09:37 |只看该作者
是不是油滴?油红染一下试试
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发表于 2012-4-1 10:40 |只看该作者
每次发现这种状况的出现,都是在我比较粗暴的对待细胞(比如用力吹打细胞,胰酶消化过度),或者细胞比较老后才传代时发生的。一般再传一两代就会好转了。
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发表于 2012-4-1 10:51 |只看该作者
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回复 雁南飞 的帖子
9 I) n% F2 m, ^0 u* a0 F, R: A8 V$ L8 u8 q( w  {& o
bingo,就是脂滴) t9 H& S+ H) e% f1 J' z6 e
楼主不要再纠结了
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发表于 2012-4-1 12:03 |只看该作者
回复 cicadacjk 的帖子
3 k! t6 q: |4 W5 ~$ G
; H5 ^5 |/ T+ }' v6 k" s脂滴?可是我每次换液后还都有。。

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发表于 2012-4-1 12:05 |只看该作者
回复 wcfeng88 的帖子
* o+ `  D- E1 [6 {7 n! c2 g% [9 r* ~" K- H/ f9 Q  Y4 |% V: A$ N
不过我每次吹打都比较用力,而且用的是自己配的(0.25Trypsin+0.02EDTA)胰酶消化液很快,不会真的是这个原因吧

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发表于 2012-4-1 12:05 |只看该作者
回复 Demon_CN 的帖子7 b) I1 I* ~& h8 m  J

3 Q" s4 Q) O9 e; W& k换液后还是有的,而且不见少

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发表于 2012-4-1 13:18 |只看该作者
回复 抹了个茶 的帖子
2 u8 W1 K3 r3 T, V" x
1 K& S3 r) k* G" f4 q我用的不是KO,就是有一家叫PAA的高糖DMEM

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发表于 2012-4-1 13:22 |只看该作者
应该是细胞碎片吧,我的小鼠细胞也有这种情况,可能是消化的时候消化过了,可以试试缩短消化时间,或者改用温和的酶消化。我试过Accutase跟typle比胰酶温和,情况好转多了。' }0 b- f/ }6 B% o( x
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发表于 2012-4-2 15:59 |只看该作者
回复 XIE冬D 的帖子
4 U; r2 i, d0 O: y# _* {- I8 |* J4 r, p8 \- j
请问你在使用胰酶消化的时候速度如何。我在用自己配的0.25%胰酶(+EDTA0.02%)和0.05%胰酶(+EDTA 0.02)以及PAA的0.25%胰酶,iPS的消化速度都非常快,20sec就都下来了。感觉是不是因为iPSC收到支原体或者什么的影响,状态不好,脱壁特别快。。。
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