EB不贴壁

ligangtiancai

如题，本人在做小鼠iPS的悬浮EB三天后将其转入6孔板中（预铺明胶过夜），第二天晚上去看都还没有贴壁，心想估计是培养基太多的问题，结果今天早上去看了还是没有贴，请教有经验的朋友这是什么原因，是培养基太多还是细胞状态问题，或者是板子问题？谢谢！

lingminliang

你可以试着改变培养基的量 或者是换成其他的板子 或者是改变基质 例如PDL或者是Lamin做一下对照 就能找到是不是细胞状态的原因了, a" ]* a( G+ E9 P2 X

ligangtiancai

回复 lingminliang 的帖子8 ]0 D4 _9 ?8 U6 ~- K/ ]9 U
* E/ H4 O1 X' c5 Y( @+ |# `& V9 c6 R
好的，请问你在EB从悬浮转至贴壁培养板中时，是一个一个EB转的还是统一一起吸了转移，一起处理会不会对EB形态产生影响？

lingminliang

一起吸了转移,影响不大

shangchunhua

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: |5 v* ?3 ]# ^7 t% q! d0 m. ^$ h  |' D3 L' E/ n
你的EB的状态怎么样啊？如果球形边缘有很多死细胞的话，EB就很难贴壁了

cailand

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; y; `) L3 H8 b9 X
8 `4 g+ A) N2 d7 k. f- e, S肯定跟培养基量没关系，EB3天挺大挺重了，很容易自然沉淀的

ligangtiancai

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/ M- Y4 y- l1 B: y2 w. U, l2 C8 o4 K2 _8 M) X! X7 P
是有死细胞，边缘感觉不平整，这是什么原因呢请问？

shangchunhua

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* y/ P" Y$ N  k. }4 q% m7 i
1 n+ }5 `) ~; p9 b可能是营养不足，或是被污染了，ES的质量也很重要

ligangtiancai

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# @1 m0 T$ W& t  w: ~: q; i8 f" N& m
营养不足应该不会，因为相对于培养基而言细胞量比较少，污染的话我也再考虑，但是也不敢确定，培养基也没浑。会不会是因为iPS在诱导EB前已有很多分化的细胞影响了EB的状态呢？