大家看看我的hES分化的形状，看是有哪些因素引起的？

BDFCM

大家看看，这是H9细胞，48代，第六天，养在20% KOSR Xeno free CTS, DMEM/F12, 4%bFGF里。大家看看是什么原因呢？+ a9 ^* t6 Z# m+ j
是bFGF浓度不够吗？6 z# T5 i4 ^7 \+ [7 x% U
期待大侠建言献策

supergama

也没有的都分化，划块把好的挑出来，传几代好了。4%的bFGF？一般是10ng/ml

BDFCM

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6 m& z3 r% D1 W; K& ^. [3 W
5 j6 ~# y, `+ p1 t6 m' G  V请问你们用的是什么培养体系？需要这么高浓度的bFGF ?
# J: ~2 u* L3 X7 s. g( FWicell的protocol是4ng的。

redmaple

我确定这是分化了，我在诱导分化的过程中出现过这种状态，原因很复杂，不能仅仅说是basic FGF的原因。

redmaple

bFGF 的浓度绝对是够了，我用fgf诱导分化，0.5ng/ml，效果就已经很明显了。

redmaple

弱弱的问一下，你想要往什么方向分化阿？看细胞的形态好像神经细胞或者成纤维细胞。

BDFCM

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# L2 R5 }. p3 k1 o: g0 J( E
, ^5 G* s* s. i, @2 o我想往中胚层分化，but now，我只想维持他的良好的干性

xyzxxx

似乎是往外胚层方向分化了
; O4 v, A. X% o( e, X如果你有noggin或是TGFbeta 可以试试看加进去抑制BMP的活性
- i: q0 C, l7 |8 |+ i; i, d7 B据我所知KOSR有内生性的BMP activity+ v/ _) ^  J( p8 `5 e3 Z
所以可以考虑降低KOSR的浓度试试。。。

fish_zbw1985

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; G4 b/ Z( u" `" L1 B. V6 V! N$ N
. i" c/ `; x: D- kBMP4就是促进中胚层分化的呀 为什么说是促进外胚层分化呢 就我知道的封闭activin或者加入bFGF可以促进外胚层分化

xyzxxx

我养的经验是canonical Wnt 才是促进中胚层分化的主要因子
; Z( G# S1 _2 y& \, ]出现BMP的话会强烈的让hES往胚胎外胚层(trophoblasts)分化。。。