PEI转染293T细胞血清影响大吗？

wangsandan0503

使用PEI转染方法转染293T细胞，培养基使用含有血清的培养基影响大吗，主要原理是什么？

supergama

有些影响，不是很大，主要原理是血清饥饿。

wangsandan0503

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1 ]: K0 |5 x/ W  V
$ Y' a0 g$ o$ d反反复复始终包不出来病毒  郁闷的要命

wangsandan0503

回复 supergama 的帖子9 o8 F. Z$ }; f8 M. F- h

+ E0 w6 J) O+ H+ Q- E你那里用什么病毒？

modou1001

最好不要用血清   使细胞处于血清饥饿状态

wangsandan0503

回复 modou1001 的帖子8 }6 L$ M* K- D, q" U6 x
& ^" r% X% y+ J. h9 }; D' s
你每次采用什么方法转染？  步骤可以分享一下嘛？

modou1001

回复 wangsandan0503 的帖子2 g" t7 H/ k* T
  U& ]" Y  l- m# \& {( F+ r9 A
电转，PEI和LTX 都用的   现在基本用后面两种， PEI 的是：溶液1是培养基和质粒的混合，溶液2是培养基和PEI的混合， 然后将溶液2缓慢加入到溶液1中  注意一定要缓慢 ，室温静置15-45分钟 我们一般是静置30分钟。在这个过程中可以做细胞的准备工作， 清洗细胞后加“三无”培养基，静置一会儿，再把上述混合的溶液加进去就可以了。 具体PEI和质粒的比例你要自己做梯度摸最适合的比例的。
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叶伟伟99

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4 @1 ~" V$ Q. I4 O三无培养基是指哪三无？谢谢！

细胞海洋

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珍珠贝儿

不知你转293T 目的是什么    我三个质粒共转检测TALEN效率，就是用的养293T的普通培养基。是可以转成功的，不过效率不是特别高   单转GFP质粒效率可60-70%