得到EB之后，如何向神经方向诱导？

jessewill

我看到了有人用ITSFn培养基筛选，有人用RA诱导，
: y8 J, I2 s& _) m0 n; J但是这两种东西我们实验室目前都没有。。。
1 W% m* m- v6 [' q, e, \我在想能不能用DMEM/F12+Neurobasal+N2B27+bFGF来诱导向neural stem cell分化。。。感激不尽

lingminliang

以前用过 不过记不太清了 好像只用用DMEM/F12就行了

开心果王

如果只是简单的鉴定向神经分化的话，用N2B27可以的，我用这个培养之后，tuj1和gfap阳性的细胞都有！不过我在加bFGF时，容易使贴壁的团块隆起。

jessewill

回复 开心果王 的帖子/ E' b7 u2 I) r* E# o' |

. L- F  o7 V6 |( K8 F  a隆起说明什么呢？增值过多？瞎猜啊

开心果王

我也没想明白！就是细胞团块一部分细胞不再贴壁了。卷起来了，看着就像隆起来了，感觉是bFGF和EGF改变了细胞的外基质，也可能是个案，楼主可以试一试先！

dianying

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9 O: B: ]1 i3 i( p
& F4 V  m: h( S& H  \你用的gGAP是哪的呀？你培养了多久就能有表达了？你的bFGF 的浓度是多少？有团块隆起的细胞照片吗？  [2 `* S$ U' L  k+ c% ]
不好意思，问题多了点。--谢谢

开心果王

悬浮培养了6d，后贴壁了6-7d就固定做IF了，团块隆起倒没记录下来，抗体是别的实验室惠赠的，sigma，货号就不记得了！

dianying

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0 I9 F  U" n6 \; u* y/ n/ \& I, J- X. Z% B6 m; P. o
听起来你染的是rossette？你确定在rossette stage有gFAP 表达吗？

dianying

回复 jessewill 的帖子8 j( Z2 X( l  P7 n+ o& W% o

+ x; X1 l0 Z4 b$ E1 Z5 m( t( }) \你得到EB以后，可以让它贴壁挑出rossette,再到npc，之后在诱导分化--这是一条老路。
/ b( y1 U9 \1 [6 Q9 c# H你的思路也不妨一试，试验都是摸索中来的。
/ m: p+ N0 H; s. ?现在也有人在用特殊的培养基直接能拿到npc，这条路省时间，但是费钱。