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请教华通氏胶的剥离     [复制链接]

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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
剥胶确实是熟能生巧,练多了自然就好剥了。脐带也是有个体差异的,有胶多胶少,有好分离不好分离,有细胞爬出的时间早晚这些差异。我们把脐带放在保存液中,4度保存5、6天,质量不是很差得脐带还是可以长出细胞的。
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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
本帖最后由 lazyworm 于 2012-2-16 13:49 编辑
3 I) t0 x0 E5 n) y; ~1 S  Q4 ?$ k1 }1 ]; C- k0 y7 v& ]6 \3 [
每当打开个网页,回复个帖子都慢的喘不过气啊。

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小小研究员

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发表于 2012-2-17 00:12 |只看该作者
回复 lazyworm 的帖子& ]/ P1 D  c, O  k) a

* T1 {7 C. E% y6 k: g% i经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅

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发表于 2012-2-17 09:17 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 细胞海洋 的帖子
/ j6 Q$ [4 t! a% B" W4 A7 v" _: c& I  ^
经常,可能是浏览量大的缘故吧,说明我们的队伍越来越强大了哈。

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发表于 2012-2-17 09:52 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
; D6 T' X7 X' L! a/ ?7 h
" ?; T2 v7 o: i$ Q  G放4度啊,要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗!有缓冲液就行了,最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了,里面加双抗。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2012-2-17 10:16 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子2 m! I6 @" J, N7 C/ C4 t/ [+ b
% I% D; a4 l( Z$ e8 `. T$ k
从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进行处理。
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发表于 2012-2-17 10:57 |只看该作者
我剥过两次,仅做参考:4 g4 m# S! c% {4 i- y. N- n( m, c4 L2 O
1.把脐带剪成小段,便于剥胶;: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L
$ {7 d( ]& G/ j) ]: j; G2.纵向稍剪开外表皮,再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开,再进行两动脉和一静脉的剥离,该过程基本全是用镊子操作;! v" B) J3 h* L7 T% D" @1 m5 I- t
3.血管分离了后再剥胶,除去血管外,表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶;, n# {* Y, R( \0 G
. |* c- e* q5 U) X& F我们剥的胶是可以撕成条的,而且质地胶白,没有你说的粘粘的,估计是采样太久或没有保存好(具体的采样和保存我也不知道)3 D: n" G# p6 `
  T5 k) t" K- g' k4 g, m只要把表皮撕开就好,不用剥离外表皮,直接把脐带摊开,再撕胶;6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?
3 q7 @. q- R( R# K* O' ^剥胶很费手劲,而且用力要恰当,撕胶的时候不要把表皮也带了;* V9 @- Y, L+ i6 T0 P9 `
# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥,静脉粗薄不好剥离,多操作几次就熟了) U% y$ x  r" o
: f/ S7 C7 J0 b2 D& L
尽量剪成小段就ok了
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发表于 2012-2-20 16:38 |只看该作者
非常感谢大家的帮忙!

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发表于 2012-2-21 09:21 |只看该作者
单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16 9 c7 m/ K% i  Q2 k& a+ S
回复 leungyk 的帖子
3 B, z) u0 T1 F: f
, \5 I' [% B- _5 k从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进 ...

$ S5 q: V3 r$ u6 c謝謝!
* X" m7 U" V, d, E- e其實我做過個小小實驗,存放在PBS+雙抗中,室溫下12h也可以,但當然效果不是太理想!
# a- Q% f+ }- n- j1 F/ ^
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发表于 2012-8-11 17:12 |只看该作者
为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢?
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