求助干细胞库相关问题

zhangy259

1. 对于脐带间充质干细胞库，需要把MSC分离出来，扩增后冻存。还是将脐带直接冻存呢？4 N5 `5 [: I$ p
2. 脐血库分离单个核细胞，一般用ficol还是用Hes？直接用血袋离心还是用一次性的离心管呢？有人了解AXP AutoXpress platform 么？
- R/ V2 E9 w) i8 G3 \3 D' R3. 鹅卵石样细胞代表什么？
: ?& ]  u$ S# w3 J6 W% u2 e4. 有国际标准的造血干细胞分离制备步骤么？请给我发一份呗！
7 N$ M4 M) ?9 ]' w谢谢各位的回答，因为自己了解不多，所以还请大家多多帮忙！非常感谢！

chuanbaozang

1. 对于脐带间充质干细胞库，是需要把MSC经过分离，培养扩增后冻存。目前不能将脐带直接冻存，有实验将脐带剪碎成组织块冻存后，虽然仍能培养出细胞，但成活率不高。: N9 y/ Z7 @! ?& m
2. 脐血库分离单个核细胞，一般用HES，直接在血袋内经过数次离心
$ r+ M4 u) ~" S# Z. m0 W3. 鹅卵石样细胞代表什么？这个怎么说呢，我们在细胞培养中通常会说上皮细胞和内皮细胞呈现铺路石状，鹅卵石，那就是近乎圆形，漂浮生长的和贴壁生长经过消化后都呈圆形啊。" h$ }# T1 o% u7 B6 \6 Z8 s7 W& z
4. 有国际标准的造血干细胞分离制备步骤么？这个你得多看看文献，手头没有，抱歉

细胞海洋

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cncpht

补充一下，脐带血造血干细胞分离制备步骤一般是2次离心法，先去红再去浆，最后加冷冻保护剂，然后放入程控降温仪降温转液氮保存。楼主说标准操作步骤还是要找一下，因为这属于体系文件，很多，一般人家不会轻易给你全套。OK？

zhangy259

谢谢回复

xbqian

1。 脐带间充质干细胞库是把脐带用机械法或酶消化法弄碎后进行培养，然后传代MSC后冷冻保存。一般用管子冻存，临床使用时做成溶液制剂。( C- R  g4 Y0 _; J
2。 脐血库分离单个核细胞用的是羟乙基淀粉离心法去除大多数的红细胞及血浆后，加入冷冻保护剂（二甲基亚砜及右旋糖酐等）程序降温至—80度以下后直接放入液氮中保存。
4 ?0 d# ^; l0 O4 |6 [3。鹅卵石样细胞一般指的是细胞培养时细胞呈椭圆形状，或集落形状呈圆形。内皮细胞常出现。4 E7 N- K1 ^) o, A: c2 _
4。国际标准的脐带血干细胞分离，一般多是以第一家脐血库纽约脐血库的标准来的，你查查纽约脐血库的报告就可获得。