慢病毒滴度测定的疑惑

sizhengliu

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不好意思，是我笔误。应该是感染8h和56h后，也就是我收集转染后48h病毒上清液，用于感染已铺板的293FT细胞（测浓度）。你说的有道理，或许是我的细胞状态不好，光镜下293FT有突起的毛刺状，疑传代次数多。怎么处理，能提高包装细胞的状态呢？

huangcong1988

回复 sizhengliu 的帖子, e/ S# I8 |/ l" m" c, v( V* a0 O

) O3 P( @" D2 y9 P9 Q细胞状态不好的话，最好的办法是换细胞，没其它法了，包毒最重要的两点：细胞状态跟质粒的质量，所以建议换好一点的细胞，其实不一定要用293FT，293T也行的

乳杆菌

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你好 我最近也在做滴度测定 请问你们用病毒上清感染293T之后 6-8小时有换新鲜培养液吗？

sizhengliu

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- B8 o0 b" ?3 e. @( C- D  t" _- K7 |1 I; r7 x1 O/ b
你好！我也是处于摸索阶段。我在感染第二天直接加新鲜培基。

乳杆菌

回复 sizhengliu 的帖子5 j- K( N7 W8 R) _% F) M4 ]" P

. B8 K$ F! _! G1 z意思是病毒上清没有吸去 加入新鲜培养液稀释吗？ 因为我看到一份protocol写的加病毒上清后48h流式 好像没有换液处理 但我们平时做感染都会在6h后更换掉病毒上清

sizhengliu

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+ l1 }$ ]& `/ T9 N6 _0 `& W6 v
) u0 c1 Z! ~8 T' {+ q是的，其实病毒颗粒一直存在于皿中的，但是被稀释了。

乳杆菌

回复 sizhengliu 的帖子3 @% n" d, j2 S3 P7 U

; @/ U3 n6 s$ [6 N+ ?: ]qq吧 275405133    我权限不够 没法批准好友申请 留言都没法= =