培养原代MSC，在消化细胞时，细胞团特别多，如果将来此消化的细胞用于临床？

xu_shufen

3 s' b0 y; l* P( {8 s  a
7 {. J8 L9 ]" f4 i各位同仁好，我现在培养原代MSC，在消化细胞时，细胞团特别多，如果将来此消化的细胞用于临床将面临很多问题，比如栓塞。如果过滤细胞将会损失很多细胞。希望大家帮助。

linghuchong123

没有震荡器吗，用什么酶消的，

大少爷

混匀冲洗，吹打开，再过滤，再传一代培养。

dyg108

请说明一下做的什么来源的MSC，用的什么方法，胰酶消化液的配方是什么，在什么样的温度下消化多长时间？
5 y0 t+ E# _  R1 L) M- A说明了这些问题以后才好判断究竟是怎么回事，用什么解决办法

漂泊的风

估计是胰酶的浓度太高了，0.25%的吧？建议你适当地降低一下胰酶的浓度（比如0.125%），这样也许会使细胞分得比较开。

xu_shufen

谢谢！我准备试一下

xu_shufen

回复 dyg108 的帖子
/ @/ X* o# t4 d0 E( W! S4 U% R3 z: k+ Q9 E! U0 E
我用的是INVITRIGEN的商品胰酶，室温下消化，我现在正在准备降低胰酶浓度。

tingwuyu

原代的细胞团多不代表传代后也多啊，除非你用于临床的细胞，消化时细胞团多，要过滤，要不然担心啥

beijingren

tingwuyu 发表于 2011-12-8 08:34
4 X4 [4 b5 e) A原代的细胞团多不代表传代后也多啊，除非你用于临床的细胞，消化时细胞团多，要过滤，要不然担心啥

+ }7 d* J. k6 N! |7 M楼主的意思将来可能会用到临床啊
# A0 r% c7 h9 W7 R, y; k我觉得楼主想问问题又有所保留* @1 n) h7 T3 ]
胰酶的浓度啊，室温多少啊，时间也没讲1 e8 d3 w6 C  g3 S# D
这个问题我觉得没有保密的意义呀
, ~# y# T6 {6 }  N( D( f/ N# C: H如果不愿意说，楼主可考虑尝试改变胰酶浓度和消化时间摸索消化条件，注意消化后细胞的活力哦

shashou_com

细胞团最好是别用来直接治疗。; n, W4 h) B. q8 i# M$ B+ q, F
你要么除去细胞团，要么重新培养。