间充质干细胞原代要长到什么程度才传代？

yangwy028

间充质干细胞从一代以后就生长的比较均匀了 。但是这个原代的细胞，一个培养瓶里面只有一两个或者几个长出细胞的组织块，一长出细胞来就是密密麻麻的一片，不知道这一片细胞面积要长到多少就要出问题该赶快传代了？剩余的这种能够长出干细胞的组织块变圆了，是不是依然比其他没有长出细胞的组织块活力旺盛，依然还能不断的长出新的细胞？要是经过了消化的话是不是就不在往外爬细胞了？多可惜啊！

呆呆鱼

我一般是在70%~80%融合度的时候开始传代的，组织块培养这种方法没用过，我是用的骨髓细胞贴壁分离得到的间充干

牙牙丫丫123

用组织块贴壁法培养的话，如果有的地方太密了，但整体细胞汇合度还没有达到传代的话，那也建议你先传一下，让剩下的组织块在细胞培养瓶里继续培养，要不然的话，组织块周围的这些细胞太密了，对已经爬出来的细胞生长不利

仁心-妙术

局部70-80%融合传代合适   传代晚了容易形成接触抑制

sdwzg119

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) J3 C( a; k: u" O- E; g  f! T9 j原代培养肯定不会是整瓶平均生长的，是一块一块的，按照我们的经验，估计长到细胞数足够多的话就消化传一次

zhang0194

组织块培养的间充质一般原代细胞伸出时间参差不齐，不用说到那个密度传代好，因为细胞长出来就不容易了，尽量考虑到大多数组织块都伸出细胞的时候传代！一两个地方密度高点也没关系，酶消化后的组织块还可以用，最多再传一次！ 个人意见!

天枰2012

部分很密集的时候就可以传了，在传的时候看到多数细胞消化了就终止，原来的培养瓶继续培养，我们有用过，效果还可以，仅供参考。

yanwugxf

原代细胞最好不要长的太久，不然细胞太密的话，容易脱落。一般的话，部分组织块长出细胞，在组织块周围长的比较密集的时候，就可以考虑传代了，P1代可以1传1或2，细胞很快就可以张起来了，扩增很迅速的。

帝国黑骑士

如果部分组织块长的很密的话就可以传了，剩下的组织块还可以再用，原代培养不可能都长得很均匀的，建议一传一，这样接种密度不会太稀长得比较快而且会比较均匀，过三天左右就可一再传p2代了。

SunYouLa

我们实验室培养间充质肝细胞是用培养皿，用得组织块贴壁法，一般局部有密集细胞，可以传代了，用PBS多洗两次，原代两个皿就穿3个皿