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[请教] trypsin、accutase、dispase的区别? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-10-27 20:07 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
向有经验的童鞋们请教下:trypsin、accutase、dispase他们在消化细胞的特性上有什么区别?适用范围是那些呢?
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沙发
发表于 2011-10-27 22:36 |只看该作者
Trypsin: 胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
! ?% d5 p/ z) C5 o0 w5 e0 U/ M详细信息见连接:http://baike.baidu.com/view/354286.htm
- i! i% z& A! x! O) r
' K5 ]5 ?/ t6 I2 t; OAccutase:用于细胞的消化时,与Trypsin相比较:Accutase 再完成消化后,不需要抑制剂;节省时间。Accutase的温和的消化,能增加细胞存活率。" X( C, C1 D* m/ |6 `4 D
详细信息见: Accutase.pdf (649.07 KB) $ R- O1 e$ \$ C  N

7 O: L8 j0 n+ }- }) u9 S+ u9 j+ g: R" n4 ^; Y) t
Dispase is a protease that is suitable for the gentle dissociation of a wide variety of tissues. Incubation of minced tissue with pre-warmed dispase and gentle agitation will liberate cells with minimal cell damage. Pre-warmed dispase can also be used to harvest cells from tissue culture plastic. Unlike trypsin, dispase is not inhibited by serum. Dispase activity is inhibited by EDTA and EGTA. Dispase should be removed from cell suspensions by centrifugation of the cells followed by washing of the cells with buffer or culture medium. # `- F, |& G1 I( L' Q9 x' ?% c% V
我就不翻译这段话了,自己看吧。5 B. R' \# }8 g+ K

, m, _, i4 r4 B5 t( \, a. a我实验中只用过Trypsin,消化过HFF,Vero,293。没用过其他两种蛋白酶。没有更多经验可谈。
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包包
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藤椅
发表于 2011-11-21 17:28 |只看该作者
你问这个问题,是要做ips诱导吧。胰酶是最常用的,它的消化能力最强,一般不用于干细胞相关实验(出了MEF传代)。6 c( g$ S1 x" |8 O: \2 @
accutase是一家智利公司的主打产品(创新细胞计数),貌似国内不好订,但是它消化很温和,详细可见楼上给出的pdf,现在做的公司可能多了,不甚了解。0 p# k3 O; }$ c. z2 e* T- n) R
dispase中性蛋白酶,作用类似四型胶原酶,文献中一般用来消化人的ips,hES细胞,不能用mdeium终止。
4 s! V9 T: b) _: M  M. u8 G" z3 G选什么来消化看你做什么用了。
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板凳
发表于 2011-11-27 00:32 |只看该作者
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dispase比较温和,一般用于表皮的消化和ADCS的消化和分离,dispase用于贴壁细胞的传代消化。
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报纸
发表于 2012-5-29 15:15 |只看该作者
谢谢啦

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地板
发表于 2012-11-13 10:19 |只看该作者
谢谢

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发表于 2018-5-23 14:52 |只看该作者
怎样才可以下载?

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发表于 2020-1-20 18:34 |只看该作者
下载不了pdf啊,威望不够
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