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请问大侠们组织贴壁培养间充质干细胞中间要换培养液吗 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2011-10-7 09:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我的组织培养干细胞已经六天了,还不见细胞爬出来,请问各位大侠们组织贴壁培养干细胞刚开始加多少培养液合适?中间需要换培养液吗?
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沙发
发表于 2011-10-7 17:50 |只看该作者
看你组织块多少,一般1:10吧,等到你看培养液发黄了,需要的话就换液。没爬出来可能与你的组织块大小有关,才6天了,再等等吧。
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金话筒 优秀会员

藤椅
发表于 2011-10-7 20:34 |只看该作者
谢谢了

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金话筒 优秀会员 美女研究员

板凳
发表于 2011-10-7 20:54 |只看该作者
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组织块贴壁法培养间充质干细胞,第三天换一次,第十天换一次,。第十四天细胞就爬出来了。注意换液的时候,要轻轻的,不要把组织块吹起来。吸培养基的时候更要轻轻的,用10mL的移液管比5mL的移液管对细胞的冲力更小,可以考虑选择10mL移液管。
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报纸
发表于 2011-10-8 15:07 |只看该作者
要换液的!随着培养时间的推移!培养基营养成分的消耗,培养基会变黄;如果不及时换液;细胞会老化,别以为组织块就没事,组织块由细胞组成的!建议根据实际情况:培养基变黄就换液!6 s! A: u# d- H+ w' g& Y
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专家 优秀会员 金话筒

地板
发表于 2011-10-9 09:35 |只看该作者
必须换液, 不要把培养基吸干, 建议半换液, 3天一次, 2周左右,应该见到细胞
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发表于 2011-10-13 12:15 |只看该作者
换液是必须的,如果细胞比重小的化就选择倒置培养(如脂肪干),这种情况就不需要换液,因为培养基是充满培养瓶的。还有一种就是正常的组织块培养,这种培养方法不能加太多培养基,否则组织块难以贴壁,换液时也需特别小心,用吸管比用倒的好,看到培养基变黄就需要换液了,一般来说要两周时间才能爬出细胞,还有就是组织块一定要剪的很碎,铺培养瓶时也不能铺的过于密集这样利于细胞爬出。
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发表于 2011-10-14 09:58 |只看该作者
我们实验室是原代接种组织块的时候培养基适当少加一点,尽量让组织块能接触到培养皿底部,利于细胞爬出,待4-5天左右可以补一部分培养基,7天左右就爬出来了,10-13天就可以传代了
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