求助，污染问题。

jss667795

最近一段时间养得大鼠骨髓间充质干细胞，总是污染。原代提取3天后，细胞上总是浮着一层白色的膜，有时在显微镜下观察，有些细胞贴壁，有些在细胞液中成团状。
0 i  d4 s0 ?+ ?: `2 z, a: n提取过程和头半年的一样，用的试剂和方法也一样，一开始以为是培养箱的问题，最近还把培养箱消毒了一次。提取前大鼠断颈处死后，酒精浸泡25分钟，超净台和细胞间都用紫外照射半个小时。因为之前提取过很多次，从来没有污染的状况，如果是技术问题，我想之前做的时候也会出现污染的状况。另外，我不确定我的细胞是不是污染了。成团状，或者表面浮一层膜，属不属于正常现象，哪位养过这种细胞的大侠帮忙解释下啊~！

lh_kitty

好像之前看过一篇这个问题的帖子

stand_up

细菌污染的话培养基会变浑浊，楼主描述的情况会不会是真菌污染，显微镜下不能确定，建议楼主做个细菌真菌培养

水兰色

试剂的批次不同，效果也会不同

tangyvhuang

有没有继续养下去啊，就是换液继续培养，贴壁的细胞是不是很正常？也许是大量的死细胞吧，原代有时候说不清楚，我遇到过这样子的，换液接着养，没什么问题。看楼主所说的，应该没什么问题的，老鼠泡25min是不是时间太长了啊，泡泡就好了，3-5min就是了

jss667795

回复 tangyvhuang 的帖子# n1 `1 @4 L' c0 J. l& S
; \* Z( A' m, ^$ f7 n
请问下，浸泡时间过长对细胞有影响吗？我养大鼠骨髓间充质。我细胞到现在都长不好，跟浸泡时间长短有关吗？