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主题:用SCID小鼠/人的淋巴瘤模型评估具有强效抗肿瘤细胞活性的细胞因子诱导杀伤性细胞
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& J( Q$ d, ~3 u- q/ e4 m说明:原文来自the journal of experimental medicine,干细胞之家新闻小组成员deron翻译(转帖请注明)4 {9 \- h g$ C, s) A1 x# d
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具有严重免疫缺陷(SCID)的C.B-17小鼠,因其缺乏功能性B、T淋巴细胞,而可以接受异种移植物,因此,能够用于人类恶性肿瘤的生物学研究。两种不同的人类B淋巴瘤细胞系——SU-DHL-4和OCI-Ly8——注入C.B-17 SCID小鼠体内。通过静脉内或者腹腔内注入不同剂量的细胞,可诱发小鼠生成肿瘤甚至死亡。各种小鼠组织中的肿瘤细胞可以用克隆肿瘤存活实验(TCA)测得,这种测定方法是用抗人B细胞抗原(CD19)的单克隆抗体(mAb)将冰冻部分着色并用PCR技术扩增检测。, J% A: k6 a7 k5 v4 R
一种淋巴毒效应细胞的方法开发并用于选择性减少骨髓中的肿瘤细胞。这些效应细胞是通过将外周血单核细胞置于干扰素γ(IFN-γ)、抗CD3抗体和白介素2(IL-2)中培养得到。IFN-γ加入的时机至关重要,最好在IL-2处理之前加入。细胞分别在IFN-γ和IL-2刺激之后,可以在抗CD3抗体作用下扩增。这些细胞可以进一步用IL-1活化,但是不要用肿瘤坏死因子α刺激。用这个方案,我们通过克隆存活实验测得99.9%的肿瘤细胞死亡。有趣的是,尽管效应细胞对淋巴瘤细胞呈现高毒性的杀伤活性,但是对正常人造血祖细胞(粒细胞/巨噬细胞集落形成单位)亚群几乎没有毒性作用。我们将含人淋巴瘤细胞系SU-DHL-4的鼠骨髓注入SCID小鼠体内以建立肿瘤模型,来进一步检验这些效应细胞(的作用)。结果发现如果注射前骨髓用细胞因子诱导杀伤性细胞处理,那么注入了SU-DHL-4骨髓的小鼠生存能力提高。SCID小鼠为淋巴瘤治疗新疗法的评估,提供了一种行之有效的体内模型。以上描述的细胞因子诱导杀伤性细胞对自体骨髓移植和过继免疫治疗的纯化,有极为重要的意义。
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