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[请教] 求助求助。。 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-7-27 11:05 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我想请教一下大家最适的lipofectamine 2000和lipofectamine LTX and PLUS的体系(就是各种成分加多少),以及具体操作的简易流程,以六孔板为例。谢谢大家。
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沙发
发表于 2011-7-27 11:13 |只看该作者
做转染之前最重要的是先确认脂质体是不是真货,我的经验是一半的脂质体是假的。假的的话无论怎么做转染效率不会高于3%,毒性也很大。
8 W* [& v; P7 t2 l" h转染效率高不高45%看脂质体质量,40%看细胞是否适合转染,15%看体系与操作水平。一般情况下变换体系转染效率不会有大的变化,顶多是减小脂质体毒性。1 F9 a4 ]3 C' D
看来你真是新手。
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藤椅
发表于 2011-7-27 11:17 |只看该作者
一般按照说明书上的做了。有写的。一般没有问题。具体的不同的细胞系你还要摸索条件,方法说明书上也有。上面列出了一些常用细胞系的转染条件。http://tools.invitrogen.com/Content/SFS/ProductNotes/F_Lipofectamine%202000b-040923-RD-MKT-TL-HL050602.pdf
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板凳
发表于 2011-7-27 11:19 |只看该作者
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这是Protocol+ q$ B: u* E7 G4 H' J1 A5 Z
Lipo 2000 protocol.pdf (144.19 KB)
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报纸
发表于 2011-7-27 15:24 |只看该作者
按照楼上的Protocol来做就可以啦,至于具体的比例,还要看你自己摸索,针对不同的细胞及不同的脂质体都不太一样。
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