求详细的冷冻切片sample处理protocol

ivantanqi

最近本人要收tissue （tendon and muscle) sample，. m% L) o: [2 n1 v
打算做一些冰冻切片和石蜡切片，后者比较熟悉，
; [8 l% c3 d( r0 I5 a' T前者没有做过，有谁有比较详细的protocol, 特别是关于怎么处理sample, 怎样固定啊，怎样冷冻啊，1 @5 j- ?1 D' C: u! T2 ~2 K
能够最大限度的保护抗原啊
2 G4 P1 O9 s' O8 f8 l2 H4 ?# d1 r有经验的，帮帮忙哦，多谢啦。

ivantanqi

最关键的问题是大家在冰冻进OCT前，固定吗？

dulaiyouyu

冰冻切片：4%PFA灌流、后固定24小时，10%、20%、30%蔗糖梯度脱水，OCT包埋，切片。

gqs2872022

组织取材及时放液氮冻存就行了，剩下的交冰冻切片的技术员处理。

aminhair

到中国病理网吧，那里有专业的人。

addlepate

找到冷冻切片机，问用过的人，这个还真没必要做书面功课，
9 b7 N  ?  D9 y% ~. [. o% _" |前面的固定和脱水就按楼上某位的指导就行了，后面包埋基本是在切片时处理（注意载玻片一般也是需要包埋过的）。

shen_coco

回复 dulaiyouyu 的帖子. O' b( {/ Q# I5 t
) Q% a" k/ [; ?
需要固定吗？直接包埋行不行啊

dulaiyouyu

回复 shen_coco 的帖子8 E5 r$ Q/ S+ B, A; o

$ B5 ?6 d* H- \7 W; ^当然要固定。

shen_coco

dulaiyouyu 发表于 2011-7-23 13:50 8 ]& w4 T7 Z1 F' w, c7 _
回复 shen_coco 的帖子3 D! P/ V% F; g& V$ A+ x

1 n  c  _9 P, C$ z' d  {; X) o当然要固定。

( ]! P" E' {' c8 X我听别人说，直接用TISSUE-TEK OCT 在-80度包埋就行，不知道这样做可以么，固定的作用主要是什么啊

runsong

是先切片后固定还是先固定后切片？