干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: pla269
go

[讨论] 扩增质粒时的摇菌问题   [复制链接]

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
2257 
威望
2257  
包包
4921  

优秀版主 帅哥研究员 积极份子 小小研究员 金话筒

11
发表于 2011-11-30 21:15 |只看该作者
回复 痞子的烟头 的帖子2 V& O, b+ u$ _( I

5 U3 u( r1 y8 C! L先在小管里面摇4-5小时在接大瓶的话是可以的!
" U" H4 G# {4 |! H$ Q8 K4 X/ i提质粒的话可以摇菌多一点,看配液的浑浊度吧!3 C) [* r, m. W- ^9 M
中间可以保菌一下!保菌的话为了保证菌的活力你可以离心收集一下再保!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 2

积分
101 
威望
101  
包包
1156  
12
发表于 2011-11-30 23:01 |只看该作者
摇菌时间主要与你的抗生素有关,氨苄和卡那霉素因为细菌的分解机理不同,一个是吸收进菌体内部作用,可以多摇一下,一般不超过16个小时,另一个是细菌分泌蛋白到细胞外,外界抗生素浓度会很快下降,摇菌时间不能超过12小时,否则就可能长杂菌。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 1

积分
威望
1  
包包
7  
13
发表于 2015-4-1 21:04 |只看该作者
回复 痞子的烟头 的帖子
9 v$ k4 S( r$ Z- N' i9 }. u$ M, [' Q
你好,我想问下:“正常是先挑菌落,于15或20的玻璃管内 5ml LB摇过夜,第二天,将5ML倒入250MLLB中,再摇过夜”这里第二天你是把5mlLB倒入250MLLB中放4°C等下午5点再摇过夜吗?还是直接把已摇过夜5ml LB放在4°C下午5点再倒入250MLLB中,再摇过夜?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
481 
威望
481  
包包
479  

优秀会员 金话筒 帅哥研究员

14
发表于 2015-4-1 22:41 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
培养一般都是12hr的,我们都是1:100接菌的,有时候需要考虑质粒的类型的,高拷贝还是低拷贝。低拷贝的有专门的处理方法。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 8Rank: 8

积分
306 
威望
306  
包包
3648  

小小研究员

15
发表于 2015-4-2 07:48 |只看该作者
回复 lingling 的帖子; m! P# L0 M. }* V5 o
* j9 B% Y6 S( `
建议你发新帖提问

Rank: 1

积分
威望
1  
包包
7  
16
发表于 2015-4-2 08:13 |只看该作者
谢谢
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2024-5-5 12:00

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.