大家感染原代细胞问题

pla269

大家用慢病毒感染原代细胞的感染效率高吗，浓缩病毒吗，什么方法浓缩啊，有没有不浓缩病毒就能提高效率的？

sdyinong

我们用的invitrogen的盒子包装慢病毒，感染原代细胞，效率可以达到30%左右，病毒滴度测得差不多在10e6左右

pla269

回复 sdyinong 的帖子/ R5 p; g! Z6 H6 }( G) y! w
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你是怎么感染的，病毒浓缩了吗，病毒滴度是用什么细胞测的 ？

sdyinong

回复 pla269 的帖子# W5 w4 _/ H, q
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没有进行浓缩，直接用的原液，检测病毒滴度时用的293FT细胞测得，同时用所要做实验的细胞也测一次，看看感染效果，确定最佳浓度

siyue13

不错，顶一个

pla269

回复 sdyinong 的帖子
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我用的293FT细胞包的病毒，然后又感染293FT，效率80%以上，可是原代细胞就很差了，你在做原代细胞吗

sdyinong

你可以适量加大一些病毒的量，但是不要太多，原代细胞感染率能达到30%就算不错了，做一个感染梯度，如果需要的细胞的纯度高，可以考虑做细胞分选

pla269

回复 sdyinong 的帖子) X2 r: h& T1 w" @, L& f

" e' n1 h% e( V我六孔板的一孔加16ml，可荧光还是不强，你做的荧光强吗

sdyinong

我用六孔板加病毒原液0.5ml可以达到至少30%左右的感染率，你在养细胞的时候注意不要让细胞长的太满了再加病毒液，一般30-50%时就可以加了，同时控制病毒原液的量不要太多，六孔板不要超过1.5ml

pla269

回复 sdyinong 的帖子4 Q! [0 C. h  R" R" O

% J7 P( ^4 u0 h# h, o( c2 g你有相关参考的文献吗？