脐带间充质干细胞的培养基要加什么因子

1301918986

各位大侠，我最近开始培养脐带间充质细胞，每次原代都成功了，可是后面传代以后细胞的状态就很不好。应该是培养基的问题吧，我现在用的是DF12加10%胎牛血清养的，请问是不是还需要加生长因子之类的，浓度是多少？谢谢各位啦！

hslh

我们加EGF

lili_19840516

我们加的谷氨酰胺

352167963

你要注意传代是原代细胞生长浓度，如果元代细胞长老的话，接种的效果就不会很好。同时也要注意传代时接种的浓度要适宜。然后培养基里面加的因子要包括贴壁因子和生长因子。

1301918986

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' p( b# p8 q7 E& \' ~呵呵，谢谢啊，浓度是10ng/ml吗？

1301918986

回复 lili_19840516 的帖子7 n# i9 I9 t( M7 I, O. L: {: _7 W

# t, \+ p# i  ^" H! l5 Q谷氨酰胺一般培养基里面不是都有吗？你的意思是它的浓度比较大，还要另外加吗？

1301918986

回复 352167963 的帖子0 g+ I3 a8 I' M" ]6 J7 R$ {3 o3 N+ ?
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原代啊，我用的是组织块培养法，当克隆中心的细胞比较密集的时候，我就传代了。传代接种密度差不多是1.5*104/cm2，应该不小吧。

352167963

回复 1301918986 的帖子( H+ f, X  B; _1 V, |& @
6 ]/ I4 R- S* k1 \# u
不是不小 是太多了  一般情况下适宜的接种浓度在0.9X104/cm2,,,接种浓度太高的话细胞的生长状态也不会很好的。

柏林小杨

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0 g$ n% t, ?( k# |6 z' z) g3 i$ {3 X' c4 ~. I# Y' S
你的组织块是怎么贴上的，我贴的组织块总是飘起来，好长时间也长不出细胞来，前提条件我们的培养基没有问题，用酶消化的细胞原代和传代后都长得很好，就是组织块长不出细胞来。

柏林小杨

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接种密度大了。