哪位大虾帮我分析一下我的细胞是怎么回事呢？

jss667795

我养大鼠骨髓间充质干细胞，用的直接贴壁培养的，长到第6天还好好地，第7天就出现很多像树杈一样的分支，我在第7天照常传代，用的胰酶加0.01%的EDTA，但是弄了半个小时，细胞还是没反应。用习惯吹打，细胞也不脱落。养了几批细胞了，最近这两批一直这样，我想知道是什么原因导致间充质干细胞变成这样的情况呢？我还培养时还要注意什么呢？养了3个月了，一点成效也没有。我是新手，真的很疑惑。

细胞海洋

建议上图

luoziwei

细胞可能老化了吧

皮搋子

注意血清水平，试着把血清降低1%、2%，如果有可能，换血清使用。
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) a. R/ e  v0 [. o1 r' d培养瓶的问题也是会导致此类事情发生，换个品牌试试。目前又卖假的康宁的瓶子，害死人啊。

hygene

上pp,可能是老化或者分化了。

lidaifu001

这种情况就是细胞老化的表现，之所以出现，考虑是细胞的营养供应不足所致，可以适当的增加换液次数来避免

gact

血清低点比较好的么？& }+ Y* [1 w! }5 j

皮搋子

血清水平越高，分化速度越快，老化速度也较快

subenjinwo

我也觉得是分化了哦。

大少爷

1.使用无血清培养基。2.使用比较好的培养瓶，我们用nunc的，很好用。3.可以提前消化传代，用胰酶即可，不加EDTA，几分钟可以消化好，吹打也行。4.培养过程中可以增加换液次数，但要注意保证无菌操作。5.可以新换一批大鼠骨髓间充质干细胞，重新培养，注意温度，CO2浓度。6.多在倒置显微镜下观察生长状况。