使用Histone Deacetylase Inhibitor提高人类SCNT囊胚的效率

hyde

Derivation of Cloned Human Blastocysts by Histone Deacetylase Inhibitor Treatment After Somatic Cell Nuclear Transfer with β-Thalassemia Fibroblasts
: Q3 r5 Q' L$ t) X. a, O: U' _/ z- L5 v使用Histone Deacetylase Inhibitor提高人类SCNT囊胚的效率
+ X7 Z  l, b+ F1 K" S- M& I  v9 c来源http://www.liebertonline.com/doi/abs/10.1089/scd.2010.0451% h! A. {$ h6 P# ~  h
干细胞之家Hyde翻译，转帖请注明。附上原文
9 K7 b' V; t$ o  ?6 k- h4 E$ F摘要：6 {" s: G7 \5 a9 o
利用SCNT获得的治疗性克隆囊胚产生人类的ESC对于再生医学和以细胞为基础的药物开发有重要的意义。但是在人SCNT后形成囊胚的效率很低。对其他一些物种SCNT胚胎发育能力的研究发现使用 histone deacetylase inhibitors（组蛋白去乙酰基酶抑制剂，一种治疗癌症的新兴药物，可以导致癌细胞的细胞周期停滞……）例如TSA（曲古菌素1 {+ W0 X: Q4 @% o2 }
A）处理胚胎来增加组蛋白的乙酰化可以增强胚胎的发育能力。本研究中，我们使用β-thalassemia fibroblast cells进行SCNT，在激活培养后的10h内使用5 nM TSA处理胚胎，胚胎的发育能力增强，这些胚胎发育到囊胚的效率比未经处理的胚胎要约高出2倍。我们对胚胎基因组DNA和线粒体DNA进行了指纹分析（ DNA and mitochondrial DNA fingerprinting analyses. ）以确保这些克隆胚胎确实来自于SCNT。另外，我们发现经过TSA处理的胚胎其组蛋白H3 lysine 9乙酰化增强的方式类似于IVF胚胎中观察到的现象。4 w1 i/ v/ E0 q
Derivation of embryonic stem cells from patient-specific cloned blastocysts by somatic cell nuclear transfer (SCNT) holds promise for both regenerative medicine and cell-based drug discovery. However, the efficiency of blastocyst formation after human SCNT is very low. The developmental competence of SCNT embryos has been previously demonstrated in several species to be enhanced by treatment with histone deacetylase inhibitors, such as trichostatin A (TSA), to increase histone acetylation. In this study, we report that treatment of SCNT embryos with 5 nM TSA for 10 h following activation incubation increased the developmental competence of human SCNT embryos constructed from β-thalassemia fibroblast cells. The efficiency of blastocyst formation from SCNT human embryos treated with TSA was approximately 2 times greater than that from untreated embryos.Cloned blastocysts were confirmed to be generated through SCNT by DNA and mitochondrial DNA fingerprinting analyses. Further, treatment of SCNT embryos with TSA improved the acetylation of histone H3 at lysine 9 in a manner similar to that observed in in vitro fertilized embryos.
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再往前走走就成克隆人了……it is crazy……/ Z7 J4 \, b6 X; q/ |5 b

tpwang

回复 hyde 的帖子1 z) R. ^) t4 X. m5 p/ h3 Z
5 }% P& L! ?7 n5 h
嗯，这方面的研究中国将会走在前面。听起来有点悖论，中国人口多到要使劲控制，但不孕不育率很高，辅助生殖很繁荣。中国人传统家庭家族观念里不孝无后非常根深蒂厚，现有的辅助生殖解决不了一些无后问题，克隆就成了唯一幻想。虽然现在不可能是大多数无后者解决问题的常规想法，但少数有资源的人的市场压力是很大的。就好比国内目前的一些市场事件，并非大多数人的意愿和诉求为基础，但少数人的冒进有可能造成规则的“突破”。- _: a( x8 v& J* G; V1 L
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当然这里面还有文化与规则的宽松问题。本质上中国文化并没有类似西方宗教那种强烈对抗人工操作生命的癖好，而且现有的辅助生殖环境获取材料的容易程度也比外面高，克隆技术也不比外面差，做出些东西来还是可能的。国内关于辅助生殖以及治疗性克隆甚至生育克隆基本上还是一个不严格明确的态度和规则。* J+ U- e9 H% Q" p( c: {6 \' K

8 |) E9 ]! E+ H! J9 D胚胎干细胞来源的局限，iPSC最近毛病缠身，治疗性克隆潜力再现是必然的。本来要没有iPSC的话，SCNT可能不会被中断到这种地步。反过来说，iPSC的玩弄也给SCNT提供了一些可借鉴的经验教训，比如表观遗传的作用，从发育角度来看卵环境的关键意义等。高的实验室去年已经发表了卵内蛋白谱系的初步鉴定，也是瞄着找出重编程关键，无论是对iPSC还是SCNT。还是要到自然过程中查找办法。8 T0 z% n9 l# v" u& B, |  g1 p

. m  S" }$ Y. L  k% U9 N打着罕见疾病的治疗作为旗帜，治疗性克隆技术如果能够获得足够的操作性效价比，不难成为另一支有效的干细胞再生医学力量，而且有可能是比较早用于临床的一支，尤其是在中国，机会大大地。生殖中心与克隆技术的结合正在一些国内大中心进行，可以预期一批成果。
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: t) F9 `, K; n5 B* F) d0 B从另一个动机来看，目前重编程技术剩下的大突破也就只能在这方向上了，不过伦理与规则是个难走的平衡木。
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  O5 x. r  W" Q2 `3 T) [( _7 E8 A: F那些囊胚都哪里去了？