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本帖最后由 细胞海洋 于 2011-4-26 08:22 编辑
; D: Z c" I3 I* O. u4 Z( Y) R; f" J" ?& P N
内容简介:流式细胞术(flow cytometry)是利用流式细胞仪(flow cytometer)对悬浮细胞或微粒进行快速、多参数分析的现代细胞分析技术。流式细胞术动用了现代多学科高新技术,能够同时定量检测单个细胞的多项指标,显示出无比优越性,已广泛应用于细胞生物学、免疫学、药理学、病理学、遗传学、血液学、肿瘤学、海洋生物以及动植物学等研究领域,对细胞的生理功能、疾病的发生与发展规律的研究起着重要作用,越来越受到众多科研人员关注。
1 t, p, t- n& Z$ D/ ]8 y目前该技术已逐步进入到临床工作与各项研究领域,并已陆续纳入到一些高等院校的教学课程。虽然该技术在国际上发展迅速,但在国内尚未达到普及化,特别是尚缺乏适合于教学的参考书。本书主要为高等院校教学而编写的。8 Z; r) m7 F6 ?/ r' Q
本书重点介绍了流式细胞仪主要内部结构、分析和分选原理、数据获取和分析方法、仪器的维护方法与注意事项、实验室常规样本制备方法,同时较全面地介绍了目前该项技术在科研和临床中广泛应用领域,以及最前沿的应用和发展动态,还介绍了流式细胞术常用试剂配制、常用实验技术的操作步骤和注意事项、流式细胞术应用实例彩色图谱,最后介绍了目前市场上畅销的美国BD公司和库尔特公司的不同配置型号流式细胞仪。该书的内容丰富,涉及面广,非常适合于做研究生和本科生教材,同时也可做从事流式细胞术的科研人员和专业技术人员参考书。 l# E, @) d% Z; p
( ~ M7 i1 d% q- I1 x目录:
8 q. ~: C! ]# \) r! d' K3 ^ n9 {第一章 流式细胞仪基本结构与工作原理
& B+ p0 c7 K @% M9 E 第一节 流式细胞术发展简史
" ~4 \) @( W9 D 第二节 流式细胞仪的基本结构# s4 d2 ^3 M: w8 M" F
一、流式细胞仪分类
: c8 Z1 p8 a! b( i% g( a1 I4 } 二、流式细胞仪的基本结构1 n% A/ x! ^" ^8 \& n
第三节 流式细胞仪的工作原理
& P) j9 e) ]: U% \ 一、流式细胞仪的分析原理
1 C. T: |, Y# q8 l) m) ?" n6 } 二、流式细胞仪的分选原理
0 D# s$ Q) h6 w* v 第四节 流式细胞仪的光信号检测
) v6 K5 L3 a# j3 H! F8 `2 L. { 一、散射光信号检测0 l9 l7 ` b( J Y
二、荧光信号检测
+ u5 t8 t" e- Q6 ]( L( s0 d 第五节 FCM常用荧光染料+ Q S! |/ y, C# f
一、单克隆抗体标记的荧光染料1 e* t% ~2 e' M" x. E
二、核酸荧光染料
3 A% n# N y; U6 B& a3 t 第六节 FCM的主要技术指标
! h9 {1 `9 u3 M6 g0 S" N 一、荧光分辨率9 Z4 y1 ?- e1 C( [9 j
二、荧光测量灵敏度
+ F9 N7 G, ~1 ^- x/ X4 B 三、前向散射光检测灵敏度
, Q B2 ^, c& P C2 T0 I8 o8 V/ e 四、FCM分析速度
9 h- ~+ @0 r9 F+ l8 ~6 R 五、FCM分选指标4 C0 k% W' B" b) g# O: b \; m
六、其他软指标$ e% R5 g6 J [' c2 `
第七节 FCM仪器校正和维护与保养方法1 p$ Z9 I6 n" W! u
一、FCM仪器校准
9 |/ g0 s' Z* M8 A% `$ e 二、FCM仪器维护与保养方法+ ]8 V' k7 s/ X" G0 k+ K) q
第二章 流式细胞术的数据采集与分析
4 U( g+ X Z$ M; T( _ 第一节 流式细胞术的数据显示方法
O/ s1 s& H" V2 `& l9 w: W# w# a; ^ 二、散点图) w( K% _7 M3 Q. F' K4 j% Y
三、等高图, H" E9 y e$ H+ S+ `0 x/ E
四、密度图
, l) D$ W3 \8 f- l' Q" v 五、假三维图
0 Z. D/ @+ U7 B+ ~& F( R! {4 i 六、三维图- e8 R C2 ?5 S6 a' E
七、多参数组合分析1 X/ c/ F7 V K# P- j* r# ]# f+ {
第二节 流式细胞术数据采集与分析方法
; ?( W/ u$ n) o: M4 r ` 一、CellQuest软件主界面
" Q* ^0 U( C. E! r' ` 二、流式细胞术的数据采集方法
; z% G# L* D, H% C& b0 ` 三、流式细胞术的数据分析方法( b- ^0 C' [. V4 ], C
第三章 流式细胞术的样品制备方法4 F, \- B2 W9 P, w6 y
第一节 单细胞悬液的制备
; b$ r5 Z# z/ |* X/ K1 g( p 一、新鲜实体组织单细胞悬液制备
0 M& e8 C3 J+ _& l. f 二、石蜡包埋组织单细胞悬液制备
% _7 ~# w' N9 G: G* R 三、培养细胞的单细胞悬液制备
/ \" _8 H* d; U$ d$ V 四、外周血单细胞悬液制备2 W) b/ B4 O7 x5 Q# M3 w4 ~
五、骨髓有核细胞悬液的制备
5 F( E/ v7 k1 [! z K+ N; H8 | 六、活检、内镜取材标本单细胞悬液制备
# V+ I0 I7 b6 T* I 七、脱落细胞的单细胞悬液制备4 X6 F/ D% i7 z# m
第二节 荧光抗体的选择与使用原则
0 V9 o) H5 x( p9 Y/ J 一、根据信噪比选择抗体滴度,低表达抗原标记7 u w5 T! E! u' x; @9 k/ P8 h; |
二、多色分析时组合抗体的使用原则7 \ q! @1 f% Z4 f& P
三、根据仪器型号和抗原表达强弱合理选择荧光南1 [! @/ _2 F9 v3 ^, J \
第三节 样品的荧光素标记与影响因素
( ^/ k+ T! }' e 一、荧光抗体直接标记法2 _; Q# u+ ?6 C5 H+ d: I: K3 Y
二、荧光抗体间接标记法( t" F) i( Q# R0 T- U! y
……2 [; D9 P2 G6 x" \' _
第四章 流式细胞术的应用$ L/ p9 _0 o( H, h
第五章 流式细胞术的优越性、发展走势与展望: o8 Z+ c- K" V2 d, A
第六章 流式细胞术常用实验方法和注意事项
( P q }- @/ [, B7 _+ t7 x参考文献
* q0 j" r& x. Z% w7 C* R8 D3 z附录1 商品化流式细胞仪概述
( I$ W$ o# f" ^* V- `# _附录2 流式细胞术应用实例彩色图谱" U2 M8 A% O6 J# J H- \2 ^$ @
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