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本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑 " N; Q0 k: z/ j: r
K6 |" h- }/ W# h4 j" O% O1. 价格：GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。" c; z4 T. d. J0 J# u9 ]4 q
3 \" `9 c" S; I3 J2. 原理：isopycnical centrifugation. 即根据密度离心，将不同密度的物质分离开来。（而非根据大小的rate zonal centrifugation）
# N+ l2 O' \( a$ Y3 q' \- N0 {: a% e0 n( g6 I, k8 \& I
3. 性质：" P. Q1 |( H4 L. [: m0 [, h' m
-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.
# U+ }7 E7 N7 X4 {
6 j! V2 Y0 ~' a7 a+ q) U& T. H-Percoll: 有PVP-coated，而且性质特殊：在10000g以下，可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml)；& ]- F1 y/ r0 b; M7 S5 c
在10000g以上，能够沉降形成continue gradient. 范围如下：& |' `" ~- Q D/ |) f! C8 p( @: D
1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl; i' ?; A& B3 v- _5 j+ y+ m, c+ u9 L
1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose) P5 |- i8 ]5 a# ~* Z6 r
percoll还有一个优点，它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS)，所以做细胞分选很方便。* L0 c$ l# D- ^; d: G
. n, o* o1 q! C. D* x! {8 ]& j' r
4. 用途：
b( V, [5 h. }8 \& ~- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过，同时也适用于脊髓干细胞的分离，骨髓干细胞的分离，也能用于颗粒细胞的分离。当然， 还有一些衍生用途，详见参考文献。 a$ C2 X0 Q, e2 C7 g$ A5 {
% y: D$ {- ?/ O3 i/ j3 {
- Percoll: 用途广泛得多，可以自制特定密度的continuous gradient，特别为自己优化分离细胞的实验条件，而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广，更多的应用在亚细胞结构的分离，病毒分离等。8 N) j7 [( z0 p3 P6 j3 R5 g
e: j& C" [/ t参考:
Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf
(874.22 KB)
Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf
(1.07 MB)
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发表于 2011-4-20 11:14
很有用，谢谢
