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[讨论] 大家做miRNA定量时一般用多大体系 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-19 15:57 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
SYBR Green 法定量小RNA,刚才看到帖子中有人用10μl,我一直用25μl,中间试过20μl,说明书推荐25μl,但是为了节省是否可以小点,不知对结果是否有影响?
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沙发
发表于 2011-4-21 14:43 |只看该作者
我做pcr包括realtime,都用20ul体系,小的话容易产生误差,不够精确,体系太大浪费。
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藤椅
发表于 2011-4-27 09:36 |只看该作者
20ul体系比较理想的。而且目前都不采用石蜡油方式,还是有部分挥发的。所以太小了不行,误差很大。
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板凳
发表于 2011-5-12 21:54 |只看该作者
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我觉的最小是20ul体系.用比较精准的枪,加完分装.
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报纸
发表于 2011-7-16 15:00 |只看该作者
回复 573639471 的帖子$ u0 Z4 A* E+ m$ v9 Y% d- W. l
+ x6 f8 z' R( L0 ]" [
你好,我想问下,你做小RNA的荧光定量PCR,用什么试剂盒比较好

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地板
发表于 2011-7-16 18:55 |只看该作者
回复 kaxdd 的帖子
# t& ^. e3 f5 d1 e7 ?' T
. i9 Y7 ~) v: }- y我使用的是一步加尾法  简便但是特异性低,有专门的试剂盒 你搜一下就能找到
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发表于 2011-7-23 19:37 |只看该作者
试剂盒推荐的体系都很大,但可以根据自己实际情况,跑个预实验看看,选择适合自己的体系。
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发表于 2011-7-23 21:18 |只看该作者
我用的是颈环引物反转录,5ul体系。4 O3 A3 K' b9 E% I
定量是15ul体系,一直比较稳定。
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