2A peptide 问题！ - 实验室综合讨论区干细胞之家



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查看: 71037\|回复: 6	go [请教] 2A peptide 问题！ [复制链接]

lorey

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楼主

发表于 2011-4-14 09:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

用2A将两个基因连接起来，在一个基因的末端加一个酶切位点，造成基因A+酶切位点+2A peptide+基因B，这种状况会不会影响基因A的表达，会不会影响2A的作用？

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gact

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沙发

发表于 2011-4-14 09:42 |只看该作者

2A序列的好处就是分别、单独、起始转录你的基因A、B，之间没有什么影响。

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王乾

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藤椅

发表于 2011-4-14 22:54 |只看该作者

楼上回答的不对，2a并非单独起始转录，而是同时转录成一个mRNA，并翻译成一个融合的蛋白，然后此蛋白在2a处被酶剪切成两个单独的蛋白，所以只要你加的酶切位点没有把前面的翻译终止掉就行，就是多几个氨基酸残基而已。

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yiiming

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板凳

发表于 2012-3-28 10:54 |只看该作者

楼上的回答也不准确，并非翻译成融合蛋白再酶切，而是翻译时核糖体在2A序列的末尾Gly-Pro处发生“跳跃”，即合成的Gly和Pro之间不形成肽键，所以可以同时翻译得到2个蛋白

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Damon-Salvatore

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报纸

发表于 2013-10-5 09:16 |只看该作者

到底那一层楼回答正确

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chutu

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地板

发表于 2013-10-5 11:41 |只看该作者

板凳正确。2A序列可以让后面的基因接近与前一个基因相同的效率表达出蛋白，还有个特点是会在前一个蛋白的C端和后一个蛋白的N端加上几个氨基酸，这额外增加的氨基酸有时可能影响蛋白的定位或功能。

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tanguixiang

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7楼

发表于 2013-10-7 18:23 |只看该作者

影响不是很大的，像IRES一样，不过IRES是多一个核糖体位点直接一条mRNA翻译两个蛋白

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