有人在做膜片钳吗？

crystal

有人在做膜片钳吗？讨论一下！

dqm185

以前跟着导师做过一段时间，当时在神经元细胞上做whole-cell clamp。你没具体问题，要讨论什么啊...

crystal

我做的是HELA细胞的全细胞膜片钳，我要记录的是CA通道情况，快一个月了，今天终于拉破了一个细胞，可是没有电流。我自己分析原因：1，HELA细胞本身没有电流。2，细胞自身问题。3，因为是昨天才消化传代的，也不知道是不是细胞膜太薄了。4，客观原因：比如电极拉的参数问题，因为今天拉电极的机子一直在打搞。目前只想到这几方面。

afei198520

膜片钳牵涉到问题实在是太多了，主要几个方面需要考虑：1.电极状态，电极有没有拉好直接关系到能不能形成好的高阻抗封接。2.细胞内外的溶液，对于相应的离子通道，会用到一些特定的细胞外液和电极内液，如果需要阻断其他的通道电流的话还要添加某些特异性的阻断剂，一般可以参考IF比较高的文献。3.最重要的是细胞状态，做了很久的膜片钳了，对于操作熟练的人来说这个就是最关键的因素了，细胞状态不好一方面会造成封接破膜障碍，另一方面即使能破膜，获得的数据也很可能失真，白费力气。楼主从以上几个方面找下原因吧，做膜片钳不容易，要耐得住寂寞，祝好运!