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ES 细 胞 是 来 自 着 床 前 胚 胎 或 胎 儿 原 始 生 殖 细 胞 的 、可
5 g3 T2 G, \! N. V6 }0 [0 w在体外分化状态下长期增殖传代培养的、具有稳定的二倍体+ `: e7 t) `. F
核型和多能干细胞表面特异标记的、可分化为三个胚层来源
" E$ s7 N. e0 C( z- \2 J- a的各种组织及细胞类型的永久细胞系。ES 细胞鉴定的理论# W3 s# P+ X/ N' l& {
基础是其生物学特性。
5 U3 e( K1 ]& q/ _' u. g 形态学特征 ES 细胞在胰酶和无 Ca2+、Mg2+培养液中形
2 E, R3 z2 n& W成相对扁平紧密的克 隆 群 , 并 易 解 离 为 单 一 细 胞 ; 而 胚 胎 生+ X2 P1 Z. R, F) h
殖细胞(EG 细胞)为圆形克隆群,且很难用常规方法解离。ES3 c7 b4 Y6 U# O) o
细 胞 生 长 缓 慢 , 对 数 生 长 期 为 36 h, 而 EG 细 胞 对 数 生 长 期
, X! r" f; T k" v& P; l: a为 12 h。人 ES 细胞与哺乳动物 ES 细胞具有相似的形态特征:
' t0 R* z1 K" \细 胞 体 积 小 , 核 大,胞 浆 少 , 有 一 个 或 多 个 核 仁 , 核 质 比 高。4 r0 ~/ S% T+ ]# _% D4 p
ES 细 胞 在 体 外 培 养 时 呈 集 落 状 生 长 , 就 集 落 形 态 而 言 , 人
1 c+ p- m" E$ E6 l3 dEG 细胞集落与小鼠 ES 细胞集落更接近呈紧密牢固结合、多1 q* G- |: X1 r
层密集立体生长的无明显细胞界限的集落; 而人 ES 细胞集" \% B. s+ c% j0 A1 O
落呈相对松散、扁平状集落, 集落内细胞界限隐约可见。
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/ q0 O e8 P h& z& P核型分析 ES 细胞具有正常稳定的二倍体核型, 可作
2 s7 `" O. @) p8 H0 a- h为生物发育机制和移植分化细胞的 研究模型。
( D+ l8 b! n8 c, J! W0 V T; v8 c4 W0 w
端 粒 酶 活 性 端 粒 是 位 于 染 色 体 末 端 的 重 复 DNA 序
5 v0 A+ Z2 Z1 a9 q列—TTAGGG, 其长度作为细胞分裂及细胞衰老的生物时钟。
- n+ Y' T3 e& Q/ I/ q' `8 m( t* {它在每一次分裂中都会变短, 但可被端粒酶修复。端粒酶是
3 Y. I+ E. g/ k8 ~5 q# C一种核糖核蛋白, 与维持真核细胞染色体末端的端粒长度和6 T% p+ m( r; n
控制细胞寿命有关。端粒长度对其复制寿命具有很重要的作/ G( x% A$ z) N9 B& D
用 , 端粒酶的 表 达 与 人 细 胞 系 的 永 生 化 程 度 高 度 相 关; 向 人
8 c6 z% T1 Z1 z. y2 |1 y& O的某些二 倍 体 细 胞 中 重 新 导 入 端 粒 酶 活 性 将 会 延 长 其 复 制
1 F y3 r6 t. p# I& e) _寿命; 人的二倍体细胞不表达端粒酶活性, 随着年龄的增长,2 v& {6 C- [2 `+ I, U
其染色体端粒 变 短 , 在 组 织 培 养 过 程 中 , 经 过 有 限 的 增 殖 期
' K2 V( y& }- I/ r后, 即进入复制衰老状态。大多数体细胞的端粒酶活性都不高,
+ c0 C; ^; m- d. F并在 50~80 代有限的增殖后进入老化阶段。ES 细胞则表达; t+ d9 R0 D1 j; F
高度端粒酶活性, ES 细胞即使长期培养 1 年, 传代 300 代仍: ]4 d7 D+ y$ M
表现有高端粒酶活性, 表明其复制寿命要长于体细胞的复制
0 P8 g7 X& r* R; U" b9 d( R( {寿命。由于 ES 细胞在体外培养中长期保持早期胚胎细胞的
: I- s- X \+ H' R' ]1 V性质, 因而对研究细胞衰老和干细胞扩增机制有重要意义。
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+ S0 u) p4 R$ B& i4 V2 @ 细 胞 表 面 抗 原 的 表 达 ES 细 胞 具 有 表 达 早 期 胚 胎 细
# |/ {3 D' a% O2 [) H7 ?胞、EG 细胞表面抗原的特性。人 ES 细胞表面抗原的表达与
' p) t$ W0 d( P3 D小鼠 ES 细胞存在明显的种属差异, 如小鼠 ES 细胞表达早期' S6 G1 l- r8 W/ V: s5 h
胚胎细胞 的 特 异 性 表 面 抗 原 SSEA- 1, 但 并 不 表 达 SSEA- 3" z7 G5 B; D8 I7 L0 ?& t) i
和 SSEA- 4,而 人 ES 细 胞 则 表 达 人 早 期 胚 胎 阶 段 特 异 性 抗, P- s! |1 R7 _ a; H
原 SSEA - 3,SSEA - 4,TRA - 1 - 60,TRA - 1 - 81; EG 细 胞 表 达! S7 \7 }& V0 W6 x* {' W) y
SSEA- 1,SSEA- 3,SSEA- 4,TRA- 1- 60,TRA- 1- 81。 人 ES 细 胞
$ H* K2 Q& i& n/ b1 h, S$ S) W8 l表 现 SSEA- 1 阴 性 , 而 小 鼠 的 ES 细 胞 和 EG 细 胞 则 表 现
( Y: _% T1 F$ C& W% A" h2 iSSEA- 1 阳性, 因此, 常用单克隆抗体 SSEA- 1 检测 ES 和 EG
5 |( T. E8 S5 [; [细 胞 表 面 抗 原 作 为 发 育 全 能 性 的 一 种 标 志 。 目 前 认 为 ,
3 _" [5 A* @+ S8 ISSEA- 1 的表达与否, 可能反映了相对扁平疏松结合的 ES 细& h2 _4 j% M. A! _ f
胞 集 落 ( SSEA- 1 阴 性 ) 与 多 层 叠 垛 集 落 的 ES 细 胞 ( SSEA- 1
( }- ~4 K6 ^0 r5 |3 v' w; p阳性) 之间的差异。碱性磷酸酶(AKP)活性常被 用来作为鉴
+ V7 a1 m3 {4 i& s+ `定 ES 细胞及其分化与否的重要标志。在早期 ES 中 AKP 活6 `# L4 ?; M' U6 l1 V7 T
性较高, 而在已分化的细胞中活性明显降低。
! p: x8 v7 Y- N% W4 B: c' R/ N
; N# g- j* a$ @7 B g) N 转 录 因 子 Oct- 4 的 表 达 Oct- 4 是 一 种 发 育 全 能 性 的
$ y' y. q' h* A- f标志基因, 为 POC 区域的一个转录因子。在小鼠, Oct- 4 只限( Z3 N: _* w+ D7 ]9 m' P
定在多潜 能 细 胞 中 表 达。
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体内外分化能力 畸胎瘤和类胚体的形成 |
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发表于 2011-3-20 21:03
谢谢
