MSC传代密度求问经验

mbpsky

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昨天MSC细胞传代，1：2传代，今天发现细胞已经长得满满的，有的已经开始老化，觉得传代时密度太大了，求问大家传代时密度怎么控制？各种细胞和代次方面有什么注意点么？培养皿和培养瓶有什么区别么？

jefferson

有文献报道MSC低密度传代有利于细胞的活性, 细胞增殖能力较强. 一般MSC 7代以后细胞就会出现老化现象.

deron

密度根据个人想象，基本上就是根据当前密度按照1：n想象。
8 k- z. X& H! [' r" l/ I" U传代方面，一般融合度的时候1：2——较高融合度的时候1：3——很高融合度的时候1：4，如果细胞长势特别喜人的话1：5都没问题。$ B5 h  ~, G/ e* w- C) T& I% y% F. x
培养用的瓶和皿，底面都是经过特殊处理的，我想没什么区别。
# k6 I* m7 P, f  Q不同细胞的生长脾性确是不同，最好根据相关文献以及请教前辈们的经验。

haoxinaok

细胞状态好的MSC五代以前的细胞，我们按照1：5的比例传代，一般3天长满。状态稍差的我们也是1:4或1:3传代，很少1:2传代，不然传代太频繁，反而易老化。培养瓶和培养皿，底面都是经过特殊处理的，应该没什么区别。

ndwzf

1:5或1:4较为合适，太密易老化。传代中有分化现象，要注意观察和检测表面标记
% l6 K8 X& ^5 Y* E培养皿强于培养瓶。

mbpsky

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) d$ V* B- |/ _/ W# l* U# h8 E' v
哦，我今天又把昨天1:3传了一次，等明天看看细胞状态

mason658616

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$ `6 i5 _( y) m
% y* N, G- p0 ?, O! H! S请问用的培养瓶大小有影响吗？我用25cm的，看别人有用75cm的，用的瓶子大有什么好处吗？

zg_zj_hz_xyj@ya

跟瓶子大小好像没什么关系，我25和75的瓶子都有养着，80%融合，按1：3传代，一般3天长满。不过最近都是1:4或1:5传，长一个星期，懒得经常去传代了。

大少爷

我们做脐带间充值干细胞，第一次传代之前会计数，按照1*10^6左右每瓶接种传代，用175cm2的培养瓶。加20ml左右培养基。三，五天左右传二代。

deron

回复 mason658616 的帖子3 k1 G) o6 p; ^$ X5 G; D6 O9 E
) _+ I/ ~$ y- z  _, Q
瓶子大小没有影响。瓶子大的收获的细胞量多。
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