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做了多次HepG2的细胞复苏,刚开始两次都没有问题,复苏成功。
. C6 c; o. e" d2 H最近好几次全都失败,细胞总是不贴壁,第二天99%都浮起来了。
& u* q1 o9 m0 z百思不得其解,密度(10000/cm2据说最合适),培养液,温度等等都试过还是不行。/ A! f+ D/ X" r, _# ?
昨天教一个同事一起看时,终于发现了一个最愚蠢的错误。3 R1 r [; Z) \: P
我用的是 corning ultra-low attachment surface! l7 N" q, u' Y v5 g* r% l& }
9 S5 G+ l6 V3 z( b
ultra-low啊 同志们哪!ultra-low!' S+ r) {1 G% k" U* o' Z( M5 ~
& x6 ^; D/ ?$ X; S2 c
转行过来就是有些常识性的问题不知道,痛苦ing!
# B) F- _% g7 V
# p6 Q" [1 n9 q7 M$ r! L1 k- K( _ E: D- S: @
然后我们把仅存的细胞消化下来 铺到12孔版上,今天他们贴壁了。
/ h& X# d( e# j# {# O6 M# r接下来我想检测一下这些还能不能用,不知道如何检测hepG2进行性退化,哎。 |
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