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本帖最后由 jefferson 于 2011-3-11 11:48 编辑
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楼上的方法是对的
/ `* c: x: ?: J; k5 i% s$ a1 o任何一种细胞都最好在-80度中放置不超过一个月, 有的肿瘤细胞在-80度放过一个月后复苏效率都很低了, 对MSC来说, 因其中可能含有一些干细胞组分, 因此最佳的冻存方式应该是用冻存液重悬后, 立即装入程序冻存盒置于-80度冻存, 24小时后即转入液氮.
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冻存液最好用培养时用的培基加10%的DMSO, 如果效果不好, 可以把FBS浓度提高到20%.
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; ?; Y" u( Z8 u$ v3 U冻存密度和预冷冻存液按照楼上说的方法.
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\$ z& D7 t/ E) ?8 w另外复苏时最好先将解冻后的细胞悬液吸入15ml离心管内, 然后再逐滴加入培基并同时混匀, 让DMSO的浓度逐渐降低, 以减少对细胞的刺激, 进而提高复苏效率 |
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