功夫不负有心人！晒下我传染的PP！和大家分享！

crystal

首先谢谢干细胞8号群的朋友，转染的过程一直给我远程讲解！

小伟-虎啸龙

这是瞬时转染的细胞吗？

siyue13

哈哈，C萨满的细胞哟

carolshen

回复 crystal 的帖子
% s# e# X& q9 Z6 n( `% |0 k
' [! ]9 Z$ R4 |6 b! a4 P  ]这是神马细胞 可否说得详细一点 大家共享下 你的方法1 ?( z6 ?% c' Y! Y2 M
谢谢！

crystal

这是我转染的hela。
% L7 q9 Z. x, C# y4 n* J/ d材料与方法：HELA细胞，6孔板，OPTI培养基，1640培养基，小牛血清，LIP2000转染试剂
+ ~9 C1 |+ k" w! M1 y6 d9 ^按每孔2*10的5次方加入HELA细胞悬液，含百分之十的小牛血清的1640培养基，当细胞达到90%左右，先PBS冲洗两次每孔，再加入OPTI培养基，2小时后开始转染，按照LIP2000的说明书，把DNA悬液和LIP悬液置5分钟后再汇合放置20分钟，再分别加入各孔，做好标记。3 U! s' L8 {& Y. K
本来说明书上是4-6小时后换含血清培养基，但因为我当时是6点半的时候开始换液，8点半做转染，但那天因为看帅哥去了误了些时间，等我转完的时候已经21：30PM，因为LIP有毒性，为了我的实验能成功，虽然很困，我还是磨磨蹭蹭的出去逛了一圈。" ~. F* l; J- S2 t% o7 X
然后23：30的时候去接加班的老公，出去吃了烧烤，再缠着老公陪我去实验室，总之我就是在等时间，又不敢回家，怕回家去了，再出来似乎很困难！照理我应该凌晨1AM的时候换液，但看到不停打哈欠的老公，实在不忍心，24：30的时候就换液了！比说明书上的最少时间4小时我提前了半小时！当时都没报希望能成的！结果没想到昨天去拍照的时候，当看到荧光出现在电脑屏上的时候，心里那个兴奋啊，别提了，还是觉得挺开心的！