酶切后DNA电泳能看见泳道，为何没有条带？

sniper

提取基因组后，电泳有结果。为何加完内切酶就跑不出带来了呢？哪位高手指点一二

aminhair

这个需要看图片才行!  一、确定操作无误，肯定加入了酶！没有溜号吧？  二、genome DNA 溶剂是什么，保存条件是什么？是不是降解了？可以从新电泳分析一下DNA条带。  三、酶切条件：包括温度和buffer的效率。重新检查并结合以前的实验经验再审视一下目前的结果！   祝你好运！

amosummer

有没有和没有酶切的做对照呢？还有就是检测酶是不是有效，可以切一下以前能切开的DNA对照。

jun8013

会不会切得时间太长了，长了就切碎了啊

绿雪

你做酶切的时候用了多少DNA？酶切完之后上样多少呢？上样量少的话肯定是看不到的啦。

sniper

回复 aminhair 的帖子% d: O8 t/ Q8 E7 a" O+ i$ ]

6 r8 q: e& |5 q. H( Z酶肯定加了，用TE溶的，保存在4℃，37℃酶切。因为不好我没照相，只能看到又跑过的痕迹，但痕迹又没有超过胶的范围

sniper

回复 jun8013 的帖子/ B4 X. N0 e  C: ?: [
; v, Q/ K7 x' M0 c1 U  P2 P. _3 t7 ]
请问，内切酶不是有特异性的切割为点吗？时间长会切碎吗？

sniper

回复 绿雪 的帖子
" z0 c  C1 T) y( o9 O% i: V! x. j5 W6 W/ P# V" {1 M% I
我也是看文献做的，酶切用2微克大约20微升，上样2微升。请问这样少吗？

张也行

回复 sniper 的帖子! N3 E/ z0 I1 N  q2 r
; {" @9 I7 |; v$ [  w( Y" v% P' R
你也太小气了，就切那么多，上样还那么少，多点几微升再看看。呵呵... ...

sniper

回复 张也行 的帖子
# {6 |2 N- P9 \; _
4 @4 l1 r5 F1 i+ v7 o也对哈，不过我只是忠于试剂盒的要求。谢谢啦，我试试看+ [+ c$ G' `" L9 a9 r% P