自发荧光怎么解决

白衣小彩

我给组织注入的是绿细胞，之后石腊包埋，做的免疫荧光组化，石腊自发荧光跟绿细胞混着都分不清。请大家帮帮忙，我用二甲苯脱腊三次，每次10分钟，切片厚度5微米

茶水

做GFP免疫荧光，推荐使用冰冻切片。, u8 q" h- l* W; ]8 d. p% ^1 r
自发荧光主要原因：1 石蜡组织形成；2 玻片形成
2 @" l9 e5 s' ^9 o: ^  ^你如果能补做冰冻切片最好。能用共聚焦检测效果最佳。* @6 d& x; f. a) Z  l! L; S, l
一般情况下，在荧光显微镜下判断自发荧光（绿光和红色完全一致的可以排除）  C( h- [& F, ?9 q7 q. V0 X8 T

白衣小彩

谢谢啦！看文献上做GFP的也是石腊包埋，就照做了，没想到。。。。55555555

yunshi503

可以试一下自发荧光消退剂，或是用光学树脂胶封片