pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

runsong

回复 sannia 的帖子
( H! y7 W5 I$ J  t/ _; `+ w6 u1 _( t7 s
我这么做只是因为经费问题，如果经费充足的话最好卖载体，或用慢病毒载体。
, j. w$ r9 |( I9 Y9 Q3 d3 {用模拟物也很好，不过比较贵，转染试剂最配套另卖。

runsong

回复 runsong 的帖子; U6 w6 C1 K" Y# B; m+ G- W

$ R3 @& G; D$ `5 h请问你们检测miRNA表达时用的是什么引物，是加poly a还是用颈环引物。但颈环引物有两个系统，不太一样，我发了相关的帖子，不知前辈有何见解。

sannia

我是加poly A的，你说的那种方法我没有做过。我倒是建议你可以设计两条引物，都试试。: ^7 e( @$ e" I+ t; c! L. I1 s
我马上要出去度假了，回来后我们可以讨论讨论 呵呵

anla0

pri-miRNA克隆的长度大概在500bp左右，前后各延伸200bp., |5 N; P4 ^3 a8 l* J! S
请教：miRNA表达时用什么载体？较好的都有哪些？我们现在用pSUPER,想换个载体。" G5 `$ N) ^6 j$ A
各位前辈不吝赐教。。。

宗生萱泽

回复 anla0 的帖子* u) C3 \- ^' ~$ W

3 ~& [6 K, V9 N% L1 L' X2 ~0 r# x请问如何找到pri-miRNA的序列呢？这500bp该怎么确定？

茅草无敌

楼主，我想问问你的microRNA扩增了多少bp啊，还有你说的加密码子是怎么加法，我不太明白

茅草无敌

回复 runsong 的帖子! R+ X' g$ H4 e4 K" a* w6 Y" T" L
4 J5 l6 ~8 I5 Q7 i7 M  _' J
楼主，你发的那个microRNA-34的文章我下不了，能麻烦你传一份给我吗
* _; M0 S# r* }/ m8 {

wjzpwyz

我也想构建个

datouqionger

正有用的，学习一下