关于使用病毒转染干细胞的问题

fordhuhudadad

各位前辈，老师，请教大家一个问题：小弟目前正在进行腺病毒、AAV和慢病毒转染干细胞的体外实验，不知道需要病毒的量，是否有这方面的宝贵经验，还望不吝赐教哦！

kostarcell

你的病毒是怎么来的？自己构建的还是外面构建好的？MOI是多少？

regene

慢病毒转染干细胞，MOI大概为10～20，即感染干细胞所需病毒的量为感染同样细胞数量293细胞的10～20倍。

kostarcell

2 e5 W. q/ M( K* ?& c: _

% j% z' Z8 b5 A7 Khttp://wenku.baidu.com/view/0e4a0ed184254b35eefd3441.html     慢病毒使用手册

regene

回复 kostarcell 的帖子
7 k  n! r& j8 e- t+ n+ ~- d
% n# U/ U$ ~! [" p6 @, P恩，不错，贴到这吧 javascript:;

fordhuhudadad

回复 regene 的帖子
+ H/ ]9 n( T2 W
  N. d- s! K1 V非常感谢regene前辈 雪中送炭 ！
6 y. i5 U9 L. D2 [! [% p过去对 病毒载体转染干细胞这方面知识确实太欠缺了，非常感谢您的 手册！！

fordhuhudadad

回复 kostarcell 的帖子! d- c% F/ {7 h6 {7 L% ?
; }. q* C8 a# q. L
您好！ 非常感谢您的指导！ 我正是在准备使用商品化的EGFP慢病毒载体转染干细胞，作为示踪的。但慢病毒 生物安全方面 ，如果可能 请给予一些介绍！; A6 n, N9 ]6 i5 ^! I* S
6 A- M9 T3 w9 {9 t
非常感谢学长！

regene

' l5 X  p' O2 g& k- X0 s8 U- J6 e
9 d( a! v3 p/ }" K
回复 fordhuhudadad 的帖子0 F! P6 L2 g' t2 o
; D) d  f' a4 h; Z% \
不用客气～5 M$ [1 j$ a- a' C
关于安全方面:: e4 v# h* Q) e- p
1.病毒操作时最好使用生物安全柜。如果使用普通超净工作台操作病毒，请不要打开排风机。$ _7 H5 L: o4 Z# G* x
2.病毒操作时请穿实验服，带口罩和手套。6 F; ~$ g0 [* a$ D
3.操作病毒时特别小心不要产生气雾或飞溅。如果操作时超净工作台有病毒污染，请立即用70%乙醇加1%的SDS 溶液擦拭干净。接触过病毒的枪头，
+ @/ [+ n7 u& E$ E离心管，培养板，培养液请于84 消毒液或1%SDS 中浸泡过夜后弃去。; [# y5 j5 ~0 e4 U) G# _

shanshuiweiwei

very good, much appreciated

syl1982

我们实验室 不让使用腺病毒，但是 还要用，注意安全啊，虽然毒性减了，但是。。。关于腺病毒可以参考[url]MYCN-regulated microRNAs repress estrogen receptor-{alpha} (ESR1) expression and neuronal differentiation in human neuroblastoma. 2010
( }: y$ W$ l8 \/ N3 D8 V 这篇文献很新2010年的，很不错# _7 b! q! v) W1 V: w
祝你好运、、、、