3 inhibitors medium used for rat ESCs

carolshen

  G  N7 T* w  @5 `: r" U# k
: h. n! g8 C4 F% v8 M
据说应其龙的3i 培养基，现以由millipore代其生产，但苦于查找不到，所以在此咨询下，不知有人定过商品化的3i medium ，有的话给个这方面的信息吧 ，谢谢啦

carolshen

自己顶下 呵呵  希望有知道的给个提示哈

carolshen

自己已经找到了答案 也公布下，希望对他人有所帮助，这些产品在stem cells公司有售，网址链接如下：9 P+ I; y  U, F
http://www.stemcellsinc.com/Tools-and-Technologies_SC-Proven-Product-Catalog/istem

ppcl2

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1 I* P. K4 c/ ~) T) }: D
. J4 B/ k% h4 E/ @* s这个太贵，用起来成本太高！, ?4 x7 ~, m$ ?5 ]) q
其实自己买2i添加就很好了，一般情况2i已足够好了，有钱可以加3i，俺试过，加了2i的培养基就已经90%以上的小鼠胚可以诱导出非常高校ES了，有了2i使得做ES细胞株犹如家常便饭，非常powerful。* g" E" {) u' ?+ O9 H
2i::  PD0325901, 1 mM with CHIR99021, 3 mM.  

carolshen

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8 z9 q/ y2 w) Y6 Q- ^( m+ H" o( e% Z
嗯 你是做小鼠的吗？
2 D- f6 u2 N& B我们课题组要做鸡ESCs，对于这个配方不清楚它的作用有多大，所以老板让试一下已经商品化的这个产品，如果有效果了，自己再配。可以把你自己的配方发我一下，学习下吗？
3 w( k; o: p; c. k- P. O1 |我的邮箱是：shf222@gmail.com  f+ Y% r1 l& z' F6 n" [9 U, v
可以在你的回信中简单介绍下你吗，以及你现在的课题，相互交流下 ，主要是我向你学习学习了 呵呵，我刚起步。 如果可以的话！. O* b+ Q* }( N- y3 r; i$ _. D
谢谢哈！

ppcl2

回复 carolshen 的帖子3 P. d* ~" |7 I; R4 S
+ F) E( p! D( j! i4 O
2i对哺乳类有效，对鸡ESCs是否有效很难说，鸡ESCs的调控好像研究的不大清楚？  l6 |; g2 x* f- b
你需要试不同的inh组合和浓度，对不起，俺对鸡ESCs没有研究。

carolshen

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* w; ]  h8 f# o
! m, s( ]8 l3 v! Q没关系的，我是借鉴小鼠，大鼠和人的方法去尝试的，毕竟是一种尝试嘛，所以就想问问你的实验方面的 呵呵

huanmiao2005

请问楼上的 在knockout的培养基中直接加入2i 就能保持MES未分化吗 还是要用N2B27呢
9 @2 k% q- [  E8 F2 `2 E) F& Q/ M

ppcl2

回复 huanmiao2005 的帖子3 o) w* p; _5 t

8 b8 {- S5 v8 w5 @' A用Invitrogen的KSR加LIF再加2i，在有feeder的情况下，可以非常有效的抑制从3.5ICM诱导ES过程中细胞的分化，普通的ES培养没有必要添加2i，当然加了更好。

ppcl2

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7 t! H# O3 T' {4 J$ H
! H  Y% n. @/ s4 ^2 q* x1 z鸡的ES细胞还是有些报道的，法国的Pain做的还可以啊，貌似并不复杂，你俺他们的方法拿不到ES细胞？% Y7 B. ?% l6 `# n# d3 n/ ?+ I2 h: }
国内浙大张才桥等人好像也在弄这个，问问他们，没必要这么浪费钱，调控通路不大一样，大鼠和小鼠都差别老大呢，有哪钱不如自己做点实验，找出更有效的细胞因子，这本身就可以发paper，呵呵。