如何把神经干细胞铺板铺的更均匀

SVZ

大家好，我现在在做神经干细胞的细胞免疫荧光染色，现在遇到问题如下，请大家帮我指点一下，谢谢！; C0 L/ f, x7 o% V) p
1。 经常会有神经干细胞贴壁不均匀的现象，请问大家有什么铺板均匀的诀窍吗?. C% v! f7 d/ x4 d. Z
2. 如果做细胞免疫荧光染色，用24孔板做增殖鉴定，大家常用的细胞铺板密度是多少？每孔加多少培养液？% r0 |# p! @) S# k; E9 c
3。大家有没有觉得比较好用的细胞计数的图像分析软件？能否推荐一下。
0 d3 }& R- P, O; d: g5 T
3 Z! l6 r: @" I/ x) S谢谢！！！！！！

青萍红檀

请问你的盖玻片怎么处理的，是用5%的HCL浸泡的吗？5%的HCL是怎么配制的，我好像配错了，谢谢

SVZ

呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

ngu3314

1. 加入细胞后将培养皿作"米"字型的晃动数次
7 k7 Z- C( J, x2. 我通常加约50,000~100,000左右的细胞，每孔约0.5 ml培养液
* I8 Z+ N1 K" a3. 我都用ImageJ，免费又强大好用，网路上也可找到很多教学3 R% @! R6 o1 R1 P

1 Q# q& p  k, h3 i2 A' L提供参考

SVZ

回复 ngu3314 的帖子: B) e8 v/ z* A, _

( J6 x& P7 o8 @6 `4 x: d学习了，谢谢！

fmmufjz

先加培养基，再把细胞悬液打进去，在放置板子时要放平稳，这样细胞一般都会分布均匀……

fmmufjz

先加培养基，再把细胞悬液打进去，在放置板子时要放平稳，这样细胞一般都会分布均匀……

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17 3 a( Z( a! u! M- g1 \2 j7 s# @- m- t) V
呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

8 x: J1 W1 |% C" f
直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？
+ p2 z1 G, f. R& z, b" b确实，爬片太麻烦了

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17
9 N7 c$ q) B7 ^) F; g% I0 A, N呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

) u- V; `; f2 `! h
直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？6 q8 X! R, c4 V, S8 }2 w/ v
确实，爬片太麻烦了

signext

SVZ 发表于 2010-12-14 21:17 5 x! ^, B5 S8 h0 L" r% B
呵呵，挺冷清的，是我提的问题太弱智了吗？我是在24孔板里直接染色，没有做爬片

) A: z* n% M( u! s
直接染色做免疫细胞化学？ 效果怎么样？ 操作有什么不同？有什么注意的？+ E& n, W% N7 ^- q
确实，爬片太麻烦了