如何解决神经干细胞球贴壁的问题？

xfyang2007123

如题，我养的神经干细胞原代就很容易贴壁，培养基应该没什么大问题（DMEM/f12）加EGF，bFGF,B27,胰岛素，肝素钠，葡萄糖！每培养瓶中加约7ml培养液（25cm培养瓶）。下面是几幅在无血清培养基中贴壁的细胞照片！

xfyang2007123

% H  Z" [! c9 w/ @5 Z: X- Z

; j$ x$ t0 J4 {4 |* E" Q  O2 h* M回复 xfyang2007123 的帖子
( N+ i" ^' ~. L, }, w6 [
' D  e6 v8 {1 W7 s" d) T) |$ e( H) G继续

leedh1223

关注

dilal

可以采用超低吸附的培养板

xfyang2007123

回复 dilal 的帖子
9 {" J3 I+ a8 I% ~+ p# X% M  J: ?$ u# M1 o9 U3 {7 w4 f
请问你们是用的什么牌子的培养瓶呢？谢谢。货号是多少？

dilal

回复 xfyang2007123 的帖子
( x/ z$ X+ \% s; n, Y& s8 I) D5 Q$ B2 m: a& ]/ S! G. h
我是做胚胎干细胞的，超低吸附的培养瓶我不清楚，你可以上网查查。我最近买了一批Corning公司的超低吸附培养板，不过还没用，不知道效果如何，据说是可以降低细胞吸附的。
/ T# s4 `) y& U& b$ Y! y我也只是一个建议，你可以想想其他的办法，比如用琼脂糖或Polyhema铺板等。

smkx

8 ^) m& x* ?* b& s- {
  O( J8 {/ i$ a/ Z; O
不知道是何种物种，成体还是胎儿？我做的是胎鼠的神经球培养，用24孔板和小皿培养出现贴壁，用6孔板则很少贴壁。贴壁与否和培养皿关系很大。

xfyang2007123

回复 smkx 的帖子
1 f- x4 K0 a- t) ?' Q0 C7 w' j& M2 D9 D
我做的是大鼠的胚胎神经干细胞。贴壁的细胞用无血清培养竟然长的还不错，估计是星形胶质细胞或少突胶质细胞了。

jennyshy

这种情况我在开始养的时候也出现过，尝试换过超低吸附的培养皿，不过后来发现用普通培养皿也照样不贴了。所以一直在想不错为什么？1 M. v" j/ z- X! j  w# O
现在估计可能是在原代分离时的问题。胎鼠的胎龄，分离的手法等等，还有就是培养基的问题，生长因子可能不够用了
0 b: ^" L6 Y+ e: ^+ ^我觉得不像是星形胶质细胞，因为它可以传代，少突胶质细胞形态上又不太像6 B% S; i5 I1 r: f+ B( [' g
倒像是贴壁长的神经干细胞，它有明显的双极突而没有神经细胞的分支。
* R$ f7 ^- I  e- W2 [6 L
% Q/ E# C7 g0 X: l个人意见

xfyang2007123

回复 jennyshy 的帖子; T) A3 [" y" y0 Y0 h; [

" a. \% ^( e  B- r1 Z& s' V你好！照片中央是神经干细胞球的贴壁部分，外周是贴壁后出现的细胞，我还没有鉴定是什么细胞，不过我用的都是无血清培养基，贴壁生长的神经干细胞生命力不知有没有这么强！我把贴壁的细胞养了一下，用的也是无血清培养基，长的还挺好，可以传代，估计是胶质细胞之类的，改天我把贴壁长的细胞照片发过来大家看看，呵呵！